纯化水微生物限度检查法验证方案 1. 验证目的： 纯化水微生物限度试验采用薄膜过滤法检查。确认该方法适合于纯化水细菌、霉菌及酵母菌数测定。 2.职责 2.1 验证委员会：负责验证方案及报告的批准并组织协调验证工作并签发验证证书。 2.2.验证组长 2.2.1.负责验证方案的起草 2.2.2.负责验证的协调工作，以保证本验证方案的顺利实施。 2.2.3.负责验证报告的审批。 2.2.4.负责发放验证证书。 2.2.5.负责再验证周期的确认。 2．3. 质保部 2．3.1.负责验证方案审核 2．3.2.负责取样及对样品的检验 2．3.3.负责收集验证记录，并加以分析后，起草验证报告。 2．3.4.负责验证数据及结果的审核 3. 参照标准： 2005 版中国药典二部附录 XI J 微生物限度检查法。 4. 验证项目： 细菌、霉菌及酵母菌计数方法的验证。 5. 合格标准： 试验组的菌回收率和稀释剂对照组的菌回收率均不得低于70%。 6. 试验材料： 6.1. 被验证产品： 品名 纯化水 取样点 总出水口 洗瓶用水 洗涤消毒 检验量 5m l 6.2. 仪器设备： 6.2.1. SYQ/ZDX-35B1 型自动座式压力蒸汽灭菌器 6.2.2. Y OKO-ZX 紫外分析暗箱 6.2.3. SW-EJ-2FB 双人净化工作台 6.2.4. 101-2A 电热鼓风干燥箱 6.2.5.SPX-250B 型生化培养箱 (23～28℃) 6.2.6.PHW-200S 恒温培养箱(35～37℃) 6.2.7.CR-50×50×65 数显隔水式恒温培养箱(30～35℃) 6.3. 稀释剂： 0.9%无菌氯化钠溶液 6.4. 验证用培养基 名称 生产厂家 批号 营养琼脂培养基 050519 营养肉汤培养基 050603 玫瑰红钠琼脂培养基 050530 改良马丁培养基 050319 改良马丁琼脂培养基 050407 6.5. 验证用菌株：(第 3 代) 7. 菌液制备 7.1. 取经 35～36℃培养18~24 小时的大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、与枯草芽孢杆菌营养肉汤新鲜培养物 1ml 加入到 9ml0.9%无菌氯化钠溶液中，10 倍稀释至 10-6~10-7 约为50~100cfu∕ml 的菌悬液备用。 7.2.取经 24～25℃培养24~48 小时的白色念珠菌改良马丁液体培养物1ml 加入到 9ml0.9%无菌氯化钠溶液中，10 倍稀释至 10-5 约为 50~100cfu∕ml 的菌悬液备用。 7.3.取经 24～25℃培养一周的黑曲霉菌斜面培养物，加 0.9%无菌氯化钠溶液 10ml 将孢子验证菌株 培养基 培养温度 培养时间（小时） 大肠埃希菌 营养肉汤 30—35℃ 金黄色葡萄球菌 营养肉汤 30—35℃ 枯草芽孢杆菌 营养肉汤 30—35℃ ...
