线栓法大鼠大脑中动脉阻断实验(MCAO 模型)的经验 本人现在正在做线栓法大鼠大脑中动脉阻断实验(MCAO 模型),这方面的资料我查了一些,这个实验我也作了一段时间,不敢说很专业了,不过现在基本上我能在 15min左右完成手术,而且手术过程中不出一滴血,造模后缺血程度基本一致。虽然前面有很多前辈发了很多 MCAO 的很专业的贴子,不过我觉得比较凌乱,现在我把我的心得体会和以前的贴子的精华部分奉献给大家,希望这会对将要做这个实验的朋友有一丝的帮助。虽然做实验总会有郁闷的时候,不过风雨之后总会见到彩虹的,这可以也是我的心得体会。衷心祝福大家能把实验做的成功、完美! 实验前准备 麻醉剂:水合氯醛(应较好的控制大鼠体温) 保温:60W 白炙灯高度为37cm 直接照射能使肛温保持在 37℃ 栓线的制备: 1.取熔点为56℃的固体石蜡一块,在瓷杯中加热熔化。直径为0.24mm、长 5cm 的鱼线一端 5mm 长的一段,垂直在熔化的石蜡中迅速浸入并提起,立即凝固的一薄层石蜡可牢固地粘附在鱼线一端的表面,其直径为0.26mm。就这样,普通的鱼线即可变成规相一致头端光滑圆钝的栓线。 2.在鱼线 18mm 的位置用涂改液标记一个白色点。 TTC 的配制:用 0.2mol/L 磷酸缓冲液(PBS)配成 2%TTC 溶液(pH7.5),避光保存 体重与栓线直径: 线栓直径 0.24mm 采用的 SD 大鼠,体重 250-300g。 实验方法: 动物用 10%水合氯醛(35mg/kg)腹腔注射麻醉。仰卧位固定,颈正中线切口,沿胸锁乳突肌内缘分离肌肉和筋膜,分离左侧颈总动脉(CCA)、颈外动脉(ECA)和颈内动脉(ICA),在 CCA 远心端和近心端及 ECA 处挂线备用。用微动脉夹暂时夹闭 ICA,然后近心端结扎 CCA、ECA。然后在距 CCA 分叉部 4mm 处剪一小口,将拴线插入到ICA,这时用绕在 CCA 远心端的细线轻轻系牢拴线。(不可过紧,否则进线困难,但松了又会出血。)用眼科镊轻推拴线,从血管分叉处开始算距离,当插入深度在 18 mm 时(一定要将血管放松至原来状态, 且保证标记点在分叉处,由于标记的是白色的所以很容易看的),紧紧系牢 CCA 远心端的细线,此时的关键是动作轻柔,不要使ICA 有任何的牵拉,否则栓线会脱出 ACA,可能会造成缺血失败。血管外的栓线不要留得过长,更不要缝在皮外,大鼠醒来后会自己拔出。缝合伤口,单笼饲养观察。如果需要再灌的话,就把拴线抽出即可,因为脑底有个动脉环,结扎一侧颈总动脉大脑不会缺血的。 ...