整理总结:细胞培养中的第一大害— — — — — — — — — — 污染 ★ ★ ★ lwf991229(金币+3,VIP+0):不错,很详细,不过有的图片打不开~~ 污染是细胞培养第一大害
预防和避免污染是细胞培养成功的关键之一
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细胞污染的类型 一、细菌污染 细菌污染是实验室细胞培养中常见的污染
一开始就要十分重视,防止污染,否则会前功尽弃,不仅浪费时间,而且浪费人力、物力,甚至造成无法弥补的损失
即使在细胞培养液中加入了抗菌素(一般为预防剂量),也可能因为操作不慎而引起污染
最常见的有革兰氏阳性菌,如枯草杆菌以及大肠杆菌、假单胞菌等革兰氏阴性菌,其中又以白色葡萄球菌较常见
培养细胞受细菌污染后,会出现培养液变混浊,pH 改变而呈现黄色
也有的 培养液肉眼观察无多少改变,只能在镜下发现菌体才知污染
所以,每天应仔细观察
污染后细胞发生病理改变,胞内颗粒增多、增粗,最后变圆脱落死亡,造成试验失败和细胞株(系)丢失
一般细菌污染进程很快,大约污染一两天后肉眼就能显著观察到
二、真菌污染 真菌污染是细胞培养过程中最常见的一种,尤其在霉雨季节进行细胞培养更易污染
最常见的真菌有烟曲霉、黑曲菌、孔子霉、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌
培养细胞受真菌污染后,可见培养液中漂浮着白色或浅黄色的小点,有的散在生长,培养液一般不发生混浊;倒置显微镜下可见丝状、管状或树枝状的菌丝纵横交错在细胞之间或培养基中,有的呈链状排列
念珠菌和酵母菌呈卵圆形散在细胞周边和细胞之间(发生卵圆形物体污染的几率很大)
个体细小,有增多趋势
镜下看时,要将培养瓶用酒精棉球擦干净,以防止与瓶外尤其瓶底外面生长的菌丝相混淆
真菌污染后,细胞生长变慢,但最后由于营养耗尽及毒性