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下载后可任意编辑生物基因工程专题报告深圳源动力生物技术有限公司一、原核基因工程上游技术二、原核基因工程下游技术一、原核基因工程上游技术下载后可任意编辑大肠杆菌表达系统的特点（1）遗传背景清楚，容易审批，例如：Amgen 四个由 E.coli 生产并向 FDA 注册上市产品，年销售额超过二十亿美元。（2）容易大规模发酵（3）克隆和表达的各种载体和菌株齐全（4）背景文献丰富，上下游配套技术产品齐全（5）易形成包涵体，但近年来讨论方向使得大量外源基因能在E.coli 里正确折叠，如 IL-11、G-CSF、GM-CSF、INF、IL-3、IL-6、Insulin、IL-2 等均可获得正确折叠的重组可溶性活性蛋白原核表达系统近年来讨论取得突破性进展1998 年，美国 Incyte Pharmaceutical 公司华裔科学家 Zhang Yang 在《Protein expression and purification 》 (vol12,159-165) 上 发 表 论 文 《 Expression of Eukaryotic proteins in soluble form in Escherichia coli》，文章采纳 E.coli 分子内伴侣 DsbA 技术将IGF-I、IGFBP-3、3Cproteinase、TGF-2、STGF-RII、BDNF、GDNF、mEGFBP、Leptin 和 GFP 十个基因全部实现了可溶性表达，且表达量均大于 25%。更为惊奇的是由于 DsbA 分子伴侣的作用使得拥有 9 个半胱氨酸的复杂结构的 IGFBP-3 能在 E.coli 内形成可溶性具生物活性的高表达重组蛋白。2024 年，美国冷泉港实验室出版的《Protein Science》(2024,11:313-321)上发表了瑞典科学家 Torleif《Rapid screening for improved solubility of small human proteins produced as fusion proteins in Escherichia coli》一文，从而揭开了原核高效快速组合筛选表达系统用于蛋白组学讨论的序幕。近年来 Medline 报导了大量利用原核表达获得有活性的可溶蛋白，现举例如下：GeneExpression methodIndexProinsulinDsbA fusionJ.Biotechnol 2001 84(2):175-85htPADsbA coexpressionAppl Environ Microbiol 1998 64(12):4891-下载后可任意编辑6Bovine enterokinase DsbA fusionBiotech nology(NY),1995,13(9):982-7 Mucin MBP fusionProtein Expr Purif 1999,15(1)146-54Human angiogeninOmpA signalBiochem Mol Biol Int1999,47(2):267-73Bacillus lipaseOmpA signalAppl Microbiol Biotechnol 1998 Apr;49(14):405-10HEV antigenThioredoxin fusionZhonghua shi...