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1 核 酸 蛋 白 测 定 仪操作规程BIO-RAD SmartSpecTM plus厦门大学医学院中心实验室黄静茹2017 年 3 月2 正式操作仪器之前请注意如下事项:首先要在仪器预约保护时间内及时使用本人注册的校园卡刷卡开始实验。1. 查看仪器使用记录本, 如之前使用者有记录仪器异常情况,请不要开机使用。2. 查看仪器整体有无异常,周围环境是否正常,需要时要开启室内空调,检查并清空除湿机水箱。3. 查看仪器使用记录本 及刷卡机“日历”,如之前使用者刚刚关机,请等候10分钟以上再开机使用。一、开机打开仪器电源开关,仪器进行自检,显示屏显示主界面。二、仪器操作点击操作界面上按钮,选择目标程序:DNA/RNA 、 Protein、 Scan、 Kinetics、 OD600、 λA. DNA/ RNA1、选择检测物质类型 (dsDNA、ssDNA、RNA 、DNA oligo 或 RNA oligo) a、按 Select 选择检测物质 dsDNA, ssDNA 或 RNA,enter接受或者修改换算因子:dsDNA: A260 1.0=50ug/ml ssDNA: A260 1.0=37ug/ml RNA: A260 1.0=40.00ug/ml b、按 Select选择 DNA 寡核苷酸 或 RNA 寡核苷酸 ,enter 输入摩尔消光系数 (molar extnctn coefficient)和分子量 (molecular weight),或者,选择系统自带方法计算摩尔消光系数和分子量,只需输入序列 (sequence)、长度(length)或组成(composition),SmartSpec Plus 会以 g / ml 和 pmol / l 为单位显示出样品浓度,并计算摩尔消光系数和分子量。2、将装有空白溶液的比色皿放入测定仪中,按Read Blank 键,获得吸收值。然后将样品放入到测定仪中,按Read Sample 键,获得数据。3、测定后光吸收和浓度数据会自动显示出,如果还有其它波长检测的数据,按 Abs 键查看即可。 DNA oligo、RNA oligo 浓度以 μ g/m或 pmol/ μ l为单位,按 Conc 键进行两种单位的转换。 按 A260/A280 键查看 DNA、RNA纯度。如果稀释因子不是1.0,按 Dilution Factor 键设定稀释因子。4、光吸收或浓度值显示出来之后,按Enter 键返回到 Ready界面,或直接放入下一个样品按Read Sample 继续读数。测定完成后,按左箭头键退出程序,并打印数据报告。B.蛋白质 protein1、选择检测方法Bradford:检测 595 nm 吸光度Lowry:检测 750 nm 吸光度BCA:检测 562 nm 吸光度UV:检测 260、280、320 nm 吸光度其它:用户指定吸收波长2、选择是否扣除背景。如果是,选择指定背景...

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