1、 验证方案的起草起草人部门日期2、 验证方案的审批审核人部门日期3、 验证方案的批准批准人批准日期目录1 前言2 职责3 验证的方法及步骤4 异常情况及偏差处理5. 验证结果评价及建议6、再验证周期1. 前言消毒剂主要使用在洁净控制区域，用于控制生产环境、设备表面等的微生物污染的一种化学剂。由于没有一种消毒剂是完全理想的，因此有必要在实际工作中使用两种以上的消毒剂。交替使用在理论上有利于防止形成相同环境的分离菌或抑制细菌的适应性。本实验方案针对① 75%乙醇、②1%新洁尔灭、 ③3%甲酚皂杀菌剂、 ④3%的过氧化氢溶液共4 种消毒剂进行抑制或者杀灭微生物的效果确认。1.1 验证的目的本验证的目的在于制定方法及可接受标准，来评价消毒剂对微生物的杀灭效果。1.3 验证的范围75%乙醇、 1%新洁尔灭、 3%甲酚皂溶液、 3%的 H2O21.4 验证内容：本验证先在实验室对所使用的消毒剂，用六种控制菌做生物指示剂挑战性实验；然后做现场消毒考察实验，即现场消毒后用棉签取样法对消毒后的表面取样，做表面残留微生物限度检查。通过对指示菌的杀灭对数值和现场消毒后洁净区表面微生物的残留限度来确认消毒剂的消毒效果。2. 职责2.1 验证小组成员：部门人员2.2 职责2.3 验证进度3. 验证方法及步骤3.1 实验材料3.3.1 菌株（1）细菌：金黄色葡萄球菌(ATCC6538)铜绿假单胞菌 (ATCC15442)大肠杆菌 (ATCC25922) 伤寒杆菌 (ATCC6539)（2）细菌芽孢：枯草杆菌芽孢(ATCC9372)（3）真菌：白色念珠菌 (ATCC10231)3.3.2 培养基无菌大豆胰蛋白胨琼脂培养基(TSA)、营养肉汤培养基。3.3.3 稀释液： 1%蛋白胨 -0.03mol/L PBS 溶液3.3.4 中和剂： 0.1%卵磷脂 +1%吐温 80 溶液；0. 5%硫代硫酸钠（ 3%过氧化氢）3.3.5 无菌试管3.3.6 无菌平皿 (90mm) 3.3.7消毒剂： 75%乙醇、 1%新洁尔灭、 3%甲酚皂溶液、 3%的 H2O23.3.8移液器及配套无菌吸头 :0-100ul，100-1000ul3.2 中和剂效力确认①中和剂效力及毒性试验目的在化学消毒试验中，达到规定消毒时间终点时，要求立即终止残留消毒剂的继续作用，以便准确检测出消毒体系中残留存活的微生物及其数量。因为消毒体系中残留的消毒剂，可能对微生物的生长繁殖具有一定抑制作用，从而可导致对杀菌效果偏高的错误判断，甚至产生假阴性结果。残留消毒剂的去除，可排除残留消毒剂对微生物的抑制，从而使试验获得正确结果。中和法是指在消毒剂与微生物作用到达规定时间...
