鸡白痢全血平板凝集试验张桂枝一、实验目的要求掌握鸡白痢全血平板凝集试验的操作方法及结果判断
二、实验原理颗粒性抗原与相应抗体结合后,在有电解质存在时,互相凝聚成肉眼可见的凝集小块
参与反应的抗原称为凝集原,抗体称为凝集素
三、在生产中的应用1、用于鉴定细菌
2、用于种鸡场鸡白痢的检疫
四、实验器材鸡白痢全血凝集反应抗原、鸡白痢阳性血清、生理盐水、洁净玻璃板、蜡笔、7#或9#注射针头、75%酒精棉球、移液器、手电筒
五、实验方法步骤1、用蜡笔将玻璃板分成3格
2、将抗原瓶充分摇匀,在3格内分别滴加一滴鸡白痢全血凝集反应抗原
3、用注射针头刺破鸡的翅静脉或冠尖,用移液器吸取全血一滴加入第1格内
五、实验方法步骤4、用移液器吸取鸡白痢阳性血清一滴加入第2格内作阳性对照,吸取生理盐水一滴加入第3格内作阴性对照
5、以上3格用牙签随即搅拌均匀,并使散开至直径约2cm为度;6、用手电筒反照玻璃板,仔细观察并判定
六、结果分析1、抗原与血清混合后在2min内发生明显颗粒状或块状凝集者为阳性
2、2分钟以内不出现凝集,或出现均匀一致的极微小颗粒,或在边缘处由于临干前出现絮状者判为阴性反应
3、在上述情况之外而不易判断为阳性或阴性者,判为可疑反应
思考题全血平板凝集反应和血清平板凝集反应有何区别
哪一个更准确
七、注意事项1、抗原应在2~15℃冷暗处保存,从杀菌之日算起有效期6个月
2、本抗原适用于产卵母鸡及1年以上公鸡,幼龄鸡敏感度较差
3、本实验应在20℃以上室温中进行
冬季检疫室内温度达不到20℃时,应先将载玻片在酒精灯加热达30℃左右
七、注意事项4、手电筒反照可以不分阴晴天或白昼
5、吸血的滴管每次先用水反复吹吸4~5次,再用生理盐水冲洗1~2次,最后以吸水纸将水吸干
6、实验完后应迅速止血,以减少失血
再给鸡饮电解多维,以减少应激