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生化分析仪常用分析方法共有三大类,分别为终点法、固定时间法和动力学法

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生化分析仪常用分析方法共有三大类,分别为终点法、固定时间法和动力学法。终点法:指经过一段时间的反应,反应达到平衡,由于反应的平衡常数很大,可认为全部底物 ( 被测物 ) 转变成产物,反应液的吸光度不再变化,只与被测物的浓度有关。这类方法通常称为“终点”法,更确切地说应称“平衡”法。单试剂单波长终点法: t1 时刻加入试剂(体积为 V), t2 刻加入样本(体积为 S),然后搅拌并反应,之后开始测量反应液的吸光度,在t3 时刻反应达到终点, t3 -t2 为测定时间。反应度 R=At3 -At2-1 ×V/(V +S) ,或R=At3-ARBLK。其中: Ati 为i 时刻的吸光度, ARBLK为试剂空白吸光度。单试剂双波长终点法:基本上同“单试剂单波长终点法”,只是对于每一个测定周期,其实际吸光度等于 Aλ 1-Aλ 2。双 试 剂 单 波 长 终 点 法 : t1 时 刻 加 入 第 一 试 剂 ( 体 积 为 V1) , t2 时 刻 加入样 本 ( 体 积 为 S) 之 后 立 即 搅 拌 , t3 时 刻 加 入 第 二 试 剂 (体 积 为V2) 并立即搅拌, t4 时刻反应达到终点。 t3-t2 为孵育时间 ,t4-t3为测定时间。在项目参数中,如果反应起始时间设为0,则反应度 R=A时刻吸光度- 双试剂空白吸光度。如果反应起始时间小于 0,则反应度 R=At4 - 双试剂空白吸光度 -t3 到 t2 间设定点的吸光度×( V1+S)/(V1 +S+V2)。双试剂双波长终点法:基本上同“双试剂单波长终点法”,只是对于每一个测定周期,其实际吸光度等于 Aλ 1-Aλ 2。固定时间法: 又称为一级动力学法、二点动力学法等,指在一定的反应时间内,反应速度与底物浓度的一次方成正比,即v=k[S] 。由于底物在不断的消耗,因此整个反应速度在不断的减小,表现为吸光度的变化越来越小。这类反应达到平衡的时间很长,理论上可以在任意时间段进行监测,但由于血清成份复杂,反应刚启动时反应较复杂,杂反应较多,必需经过一段延迟时间才能进入稳定反应期。t1 时刻加入试剂 ( 体积为 V) ,之后测量试剂空白的吸光度,t2 时刻加入样本 ( 体积为 S),t3时刻反应稳定,t4 时刻停止对反应进行监测;t2 - t3 为延迟时间,t3 - t4 为测定时间 。单 波 长 反 应 度 ( 单 双 试 剂 相 同 ) :R=At4— At3 双 波 长 反应度: R=(t4 时刻主波长吸光度- t4 时刻次波长吸光度) - -(t3 时刻主...

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