完美 WORD 格式专业整理知识分享XX肿瘤相关功能基因XXX研究课题设计一、 XX肿瘤相关基因功能研究整体技术路线不同肿瘤细胞株XXX 表达检测XXX shRNA lentivirus细胞功能实验增殖 (MTT)细胞周期与凋亡(流式PI&Annexin V 双染 )克隆形成侵袭转移(transwell 实验 )裸鼠成瘤实验肿瘤细胞沉默XXX 后成瘤肿瘤细胞成瘤后定点注射瘤体2株高表达 XXX 基因肿瘤细胞平行实验作用机理研究 real-time PCR检测下游分子表达变化Western blot验证 Genechip co-IP GST-pull down相关表型分析相关分子检测肿瘤临床标本检测组织芯片或免疫组化分析 XXX 表达与肿瘤发生、转移和预后的相关性XXX non-silencing lentivirusXXX rescue lentivirusWestern blot & real-time PCR预实验Part.1Part.2Part.3Part.4Rescue实验Part.5XXX 与化疗、放疗敏感性关系的分析与实验研究CellTissue完美 WORD 格式专业整理知识分享二、合作项目简介整个文章的研究思路是, 在临床病理当中发现在XX肿瘤标本中 XXX基因特异性高表达,在相应的肿瘤细胞系也得到一致的结果,随后选取2 株典型的细胞系用XXX基因的 RNAi的lentivirus获得细胞、整体水平研究数据,了解该基因沉默后对肿瘤增殖,凋亡,侵袭转移能力的影响。最后检测XXX基因的下游作用分子,寻找其可能的作用途径。预期文章数据框架: Fig.1 肿瘤病理标本中研究的靶基因呈现表达上调(免疫组化或qPCR)Fig.2 不同的 XX肿瘤细胞株中该基因的表达也显著增高Fig.3慢病毒( lentivirus)结构图,肿瘤细胞感染图片Fig.4 靶基因 RNAi 慢病毒感染肿瘤细胞后,mRNA和蛋白表达显著下调(qPCR和 western )Fig.5 在两株细胞上沉默靶基因之后平行的MTT结果及统计Fig.6 在两株细胞上沉默靶基因之后流式分析细胞周期,计算凋亡率Fig.7 在两株细胞上沉默靶基因之后克隆形成能力变化,图片和统计结果Fig.8 用肿瘤细胞感染RNAi 慢病毒制备成稳定细胞株,然后做裸鼠成瘤实验,裸鼠图片,每天量瘤子大小,做肿瘤生长曲线,4 周处死称瘤重,计算抑瘤率。Fig.9下游基因的qPCR检测结果(如果有阳性结果就放上去)Fig.10 western blot验证上述实验结果三、实验方案1、XXX在 XX细胞表达检测实验实验内容:选取多株XX细胞株,检测XXX基因的表达,高表达XXX基因的两株细胞用于后续 RNAi 的研究。1.qPCR检测不同细胞株中XXX的 mRNA水平;2.对 XXX表达阳性的细胞株进行感染预实验,确定各个细胞株病...