膜蛋白的提取与分离膜蛋白的分离一、简介：1细胞质膜资料1895年,Overton 从研究细胞透性得出 "细胞膜由连续的脂类物质组成"。1925年 Gorter&Grendel: 用脂单分子膜技术测定细胞膜中脂分子的总面积，提出： "细胞膜是由双层脂分子组成"。1935年 Danielli&Davson ：从测定膜的表面张力得出细胞膜的"三明治结构模型 "，即蛋白质－脂 -蛋白质。1959年 Robertson: 用电镜观察生物膜提出 "单位膜模型 "，将膜的分子结构与超微机构统一起来厚度： 2(暗)+3.5( 亮)+2 （暗） =7.5 细胞质膜的主要功能概括如下：(1) 为细胞的生命活动提供相对稳定的内环境; (2) 选择性的物质运输，包括代谢底物的输入与代谢产物的排除，其中伴随着能量的传递；(3) 提供细胞识别位点，并完成细胞内外信息跨膜传递；(4) 为多种酶提供结合位点，使酶促反应高效而有序地进行；(5) 介导细胞与细胞、细胞与基质之间的连接; 质膜参与形成具有不同功能的细胞表面特化结构。2膜蛋白虽动物细胞主要有 9种膜脂，而膜蛋白的种类繁多， 多数膜蛋白分子数目较少，但却赋予细胞膜非常重要的生物学功能。根据膜蛋白分离的难易及其与脂分子的结合方式，膜蛋白可分为两大类型：外在膜蛋白、内在膜蛋白。(1) 外在膜蛋白为水溶性蛋白， 靠离子键或其它较弱的键与膜表面的蛋白质分子或脂分子结合，因此只要改变溶液的离子强度甚至提高温度就可以从膜上分离下来，膜结构并不被破坏。(2) 内在膜蛋白与膜结合非常紧密，一般讲只有用去垢剂(detergent)使膜解后才可分离出来。获 得 大 量 有 生 物 学 活 性 的 质 膜 蛋 白 对 我 们 显 得 非 常 的 重 要 。附注：使用分级抽提方法获得的“膜蛋白 ”中只有很少一部分是具备多跨膜区的整和膜蛋白，膜蛋白，到目前为止，仍然是蛋白组学的一个瓶颈，不管采用２－Ｄ技术也好，ＩＣＡＴ乃至proein microarray 都还不能有效解决这一问题。二、蛋白抽提三、谈及蛋白分离，我们想到：超速离心，盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法 ⋯⋯有时这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化。由于蛋白质种类繁多，不同的蛋白质由于结构和组成的差异，其溶解度也各不相同 .根据蛋白质的溶解特性， 同时可选择不同的溶剂提取，分为水溶液提取和有机溶剂提取.四、但是针对膜蛋白的提取与细胞质蛋白，核蛋白提取不同之处在于它是嵌在膜中...
