第四章第四章抗菌药物的敏感性试验抗菌药物的敏感性试验药敏试验的意义药敏试验的意义11、可预测抗菌治疗的效果、可预测抗菌治疗的效果22、指导临床抗菌药物的使用、指导临床抗菌药物的使用33、发现或提示细菌耐药机制，帮助临床医生合理、发现或提示细菌耐药机制，帮助临床医生合理使用抗菌药物使用抗菌药物44、监测细菌的耐用性，分析耐药菌的变化，预防、监测细菌的耐用性，分析耐药菌的变化，预防和控制耐药菌感染的发生和流行和控制耐药菌感染的发生和流行抗菌药物的敏感性试验抗菌药物的敏感性试验常用方法：纸片扩散法纸片扩散法微量液体稀释法微量液体稀释法E-TESTE-TEST法法原理：原理：将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸收琼测试菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸收琼脂中水分溶解后不断向纸片周围扩散形成递减的脂中水分溶解后不断向纸片周围扩散形成递减的梯度浓度，在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的梯度浓度，在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制，从而形成无菌生长的透明圈即为抑生长被抑制，从而形成无菌生长的透明圈即为抑菌圈。菌圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度，并与该药对测试菌的敏感程度，并与该药对测试菌的MICMIC呈负相关。呈负相关。纸片扩散法（纸片扩散法（Kirby-BauKirby-Bauerer法）法）操作方法操作方法：：1.1.将在约将在约56℃56℃恒温的无菌恒温的无菌M-HM-H（水解硌蛋白）琼脂（水解硌蛋白）琼脂倾注直径为倾注直径为90mm90mm的平板，其厚度的平板，其厚度4mm4mm。。2.2.无菌挑取孵育无菌挑取孵育1616～～24h24h的血平板上的血平板上44~~55个菌落。个菌落。3.3.置于无菌生理盐水中，校正其浊度于置于无菌生理盐水中，校正其浊度于McFarlandMcFarlandNo0.5No0.5管。管。4.4.用无菌棉签浸入细菌悬用无菌棉签浸入细菌悬液中，将拭子在试管上壁液中，将拭子在试管上壁轻轻挤压以挤去过多的菌轻轻挤压以挤去过多的菌液。棉签在三个方向均匀液。棉签在三个方向均匀抹琼脂表面（每次转抹琼脂表面（每次转6060℃℃）使菌液均匀分布，最）使菌液均匀分布，最后沿平板内缘涂抹一周。后沿平板内缘涂抹一周。5.5.盖上平板的盖子，放置培养箱内孵育，放置盖上平板的盖子，放置培养箱内孵育，放置3~103~10分分钟钟后贴上标准抗生素纸片。后贴上标准抗生素纸片。6.6.根据选择的菌株挑选相应的抗菌纸片。根据选择的菌株挑选相应的抗菌纸片。肠杆菌科：氨苄西林、阿米卡星、哌拉西林肠杆菌科：氨苄西林、阿米卡星、哌拉西林//他唑巴坦、头孢噻肟、环丙沙星、亚胺培他唑巴坦、头孢噻肟、环丙沙星、亚胺培南、氨曲南、庆大霉素；南、氨曲南、庆大霉素；铜绿假单胞菌：头孢他啶、庆大霉素、哌拉西林、铜绿假单胞菌：头孢他啶、庆大霉素、哌拉西林、阿米卡星、环丙沙星、头孢吡肟、亚胺培阿米卡星、环丙沙星、头孢吡肟、亚胺培南；南；葡萄球菌属：头孢西丁、青霉素、红霉素、万古霉葡萄球菌属：头孢西丁、青霉素、红霉素、万古霉素、环丙沙星、庆大霉素、利福平；素、环丙沙星、庆大霉素、利福平；肠球菌属：青霉素、万古霉素、甲氧苄啶肠球菌属：青霉素、万古霉素、甲氧苄啶//磺胺异磺胺异噁唑、庆大霉素、环丙沙星、红霉素、氨苄西林噁唑、庆大霉素、环丙沙星、红霉素、氨苄西林不动杆菌属：头孢他啶、亚胺培南、阿米卡星、哌拉不动杆菌属：头孢他啶、亚胺培南、阿米卡星、哌拉西林西林//他唑巴坦、头孢吡肟、头孢曲松、环丙沙他唑巴坦、头孢吡肟、头孢曲松、环丙沙星、米诺环素；星、米诺环素；洋葱伯克霍德菌：头孢他啶、米诺环素、甲氧苄啶洋葱伯克霍德菌：头孢他啶、米诺环素、甲氧苄啶//磺磺胺异噁唑、美罗培南；胺异噁唑、美罗培南；嗜麦芽窄食单胞菌：甲氧苄啶嗜麦芽窄食单胞菌：甲氧苄啶//磺胺异噁唑、左氧氟沙磺胺异噁唑、左氧氟沙星、米诺环素；星、米诺环素；嗜血杆菌属：氨苄西林、甲氧苄啶嗜血杆菌属：氨苄西林、甲氧苄啶//磺胺异噁唑、头孢磺胺异噁唑、头孢他啶、美罗培南、阿奇霉素、环丙沙星、头孢克他...
