微生物的培养和应用课题1微生物的实验室培养一、培养基1、概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配置出供其生长繁殖的营养基质。一般都含有四类物质。2、营养成分：碳源、氮源、水、无机盐营养物质含义主要来源碳源提供碳元素的物质无机物：CO2、NaHCO3；有机物：糖类、脂肪酸、石油等氮源提供氮元素的物质无机物：N2、NH3、氨盐、硝酸盐；有机物：尿素、牛肉膏、蛋白胨水细胞生命活动必不可少的物质无机盐提供除碳、氮元素以外的各种重要元素培养基还需要满足不同微生物生长对pH、氧气、特殊营养物质的要求培养基的配制原则(1)目的要明确(2)营养要协调(3)pH要适宜按形态划分固体培养基液体培养基半固体培养基微生物在培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落固体根霉曲霉青霉4、分类：固体培养基半固体培养基液体培养基主要用于微生物的分离、计数等主要用于观察微生物的运动、鉴定菌种等主要用于工业生产需加入凝固剂，如琼脂液体培养基：液体培养基：表面生长表面生长均匀混浊生长均匀混浊生长沉淀生长沉淀生长backback半固体培养基：半固体培养基：无动力无动力有动力有动力((弥散弥散))固体培养基：菌落固体培养基：菌落按用途划分基础培养基：鉴别培养基:含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基（牛肉膏蛋白胨培养基）用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基。在培养基中加入特殊营养物质或化学物质，有利于特定微生物的生长，同时抑制其它微生物的生长。选择培养基:用于鉴别不同类型微生物的培养基。微生物产生某种代谢产物，与培养基中的特殊化学物质发生特定的化学反应，产生明显的特征变化。按成分划分：天然培养基和合成培养基二、无菌技术（1）对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行。（2）将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行。（3）为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在（4）实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。清洁和消毒灭菌获得纯净微生物的关键是防止外来杂菌的入侵酒精灯火焰附近进行消毒灭菌概念指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部的微生物(不包括)指使用强烈的理化因素杀死物体内外微生物，包括。常用方法适用对象操作空间、液体、双手等接种环、接种针、玻璃器皿，培养基等部分芽孢和孢子所有芽孢和孢子煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌①①灼烧灭菌灼烧灭菌②②干热灭菌干热灭菌③③高压蒸气灭菌高压蒸气灭菌100kPa100kPa、、121℃121℃下维持下维持15-30min15-30min..灭菌的方法灭菌的方法课P851.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。（1）培养细菌用的培养基与培养皿（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管（3）实验操作者的双手避免操作者被微生物感染（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。计算称量溶化灭菌倒平板三、微生物培养的实验操作1、制备培养基制备培养基纯化大肠杆菌（一）制备牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养大肠杆菌）牛肉膏蛋白胨固体培养基配方牛肉膏5.0g蛋白胨10.0gNaCl5.0g琼脂20.0g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000mL1.计算操作步骤根据牛肉膏、蛋白胨固体培养基配方的比例，计算配置100mL培养基是各成分的用量2.称量准确称取各种成分注意：1、牛肉膏比较粘稠，可用玻璃棒挑取，放在称量纸上称量2、牛肉膏和蛋白胨都容易吸潮，称取动作要快，称后要及时盖上瓶盖3.溶化（1）将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量水，加热。（2）当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸(3)加入称量好的蛋白胨和氯化钠，用玻璃棒搅拌，使其溶解(4)加入琼脂，加热使其熔化。并不断用玻璃棒搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。(5)当琼脂完全融化后，补加蒸馏水至100mL。4.灭菌5.倒平板将50ml培养基用玻璃棒转移至锥形瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入高压蒸气灭菌锅，在压力为100kPa、温度为121℃，灭菌15～30min。将培养皿...
