实验三细菌的分布与消毒灭菌【目的】①了解细菌广泛分布于自然界及正常人体,树立“有菌观念”,从而认识无菌操作对于微生物学及医学实践的重要性
②了解正常人体中寄居着种类繁多的细菌,正常情况下不引起人类疾病, 称为正常菌群
③熟悉外界因素对细菌的影响,学习常用的消毒灭菌方法
④了解不同细菌对外界因素具有不同的抵抗力
一、细菌的分布检查(一)空气中的细菌检查【材料】普通琼脂平板培养基
【方法】①取普通琼脂平板一只开启皿盖,培养基面向上放于实验桌上,暴露5~30min 后盖好
②置 37℃培养 18~24 小时后观察结果
【结果】 (填表 10-1 )平板培养基表面或多或少有菌落生长
(二)地面水中的细菌检查【材料】地面水 ( 河水、井水或池水 ) 、高层琼脂培养基、 1ml 无菌吸管、 灭菌培养皿
【方法】①以无菌吸管吸取1ml 地面水,加入灭菌平皿中
②将已溶化且冷至45℃左右的高层琼脂倾注人上述平皿中,加盖后轻轻摇动,使水与琼脂充分混匀,静凝
③37℃ 24 小时后取出观察,计数菌落
【结果】 (填表 10-1 )(三)衣服、票证、头发、手指皮肤上的细菌检查【材料】普通琼脂平板培养基
【方法】取普通平板一个,用蜡笔在平板背面玻璃上划成四等分,并贴上标签( 图10-1)
然后以无菌操作法,用衣袖角、票证、头发及手指或指甲内污物,在平板培养基表面相应部位轻轻涂抹,置37℃培养 24 小时,观察并记录结果
【结果】 填表培养基表面涂抹处有菌落生长
衣服、 票证、头发、手指皮肤上的细菌检查(四)正常人体咽喉部的细菌检查【材料】血液琼脂平板培养基、灭菌棉拭、接种环、酒精灯
【方法】取灭菌棉拭一支, 在被检查者咽喉部轻轻涂擦后,再涂于血液琼脂培养基—侧,然后改用灭菌接种环作分离划线接种
盖上皿盖,37℃孵育 24 小时(或者采用咳喋法)
【结果】 (填表 10-1 )琼脂平板表面有菌落生