实验三细菌的分布与消毒灭菌【目的】①了解细菌广泛分布于自然界及正常人体，树立“有菌观念”，从而认识无菌操作对于微生物学及医学实践的重要性。②了解正常人体中寄居着种类繁多的细菌，正常情况下不引起人类疾病， 称为正常菌群。③熟悉外界因素对细菌的影响，学习常用的消毒灭菌方法。④了解不同细菌对外界因素具有不同的抵抗力。一、细菌的分布检查（一）空气中的细菌检查【材料】普通琼脂平板培养基。【方法】①取普通琼脂平板一只开启皿盖，培养基面向上放于实验桌上，暴露5～30min 后盖好。②置 37℃培养 18～24 小时后观察结果。【结果】 （填表 10-1 ）平板培养基表面或多或少有菌落生长。（二）地面水中的细菌检查【材料】地面水 ( 河水、井水或池水 ) 、高层琼脂培养基、 1ml 无菌吸管、 灭菌培养皿。【方法】①以无菌吸管吸取1ml 地面水，加入灭菌平皿中。②将已溶化且冷至45℃左右的高层琼脂倾注人上述平皿中，加盖后轻轻摇动，使水与琼脂充分混匀，静凝。③37℃ 24 小时后取出观察，计数菌落。【结果】 （填表 10-1 ）（三）衣服、票证、头发、手指皮肤上的细菌检查【材料】普通琼脂平板培养基。【方法】取普通平板一个，用蜡笔在平板背面玻璃上划成四等分，并贴上标签( 图10-1) 。然后以无菌操作法，用衣袖角、票证、头发及手指或指甲内污物，在平板培养基表面相应部位轻轻涂抹，置37℃培养 24 小时，观察并记录结果。【结果】 填表培养基表面涂抹处有菌落生长。衣服、 票证、头发、手指皮肤上的细菌检查（四）正常人体咽喉部的细菌检查【材料】血液琼脂平板培养基、灭菌棉拭、接种环、酒精灯。【方法】取灭菌棉拭一支， 在被检查者咽喉部轻轻涂擦后，再涂于血液琼脂培养基—侧，然后改用灭菌接种环作分离划线接种。盖上皿盖，37℃孵育 24 小时（或者采用咳喋法）。【结果】 （填表 10-1 ）琼脂平板表面有菌落生长。 其中占优势的是一种细小菌落，其周围有草绿色的不完全溶血环。此为咽喉部的正常菌群—甲型链球菌。（五）实验结果观察 ( 填表 ) 细菌分布的实验结果检查材料空气水衣角票证头发手指咽喉部细菌生长情况菌落个数实验体会二、消毒灭菌试验（一）煮沸与高压灭菌法【原理】高温对细菌有明显的致死作用，主要机制是凝固菌体蛋白质，也可能与细菌DNA单螺旋断裂、细菌细胞膜功能受损及菌体内电解质浓缩有关。湿热灭菌法所需温度比干热法为低，时间较短。尤其是高压蒸气灭菌，因增加...
