质谱定量的原则系列讲座（转自分析测试百科叮当 空间）质谱定量的原则01--目录：1．质谱定量的简介a) 总离子流b) 选择离子监测（ SIM ）c) 选择反应监测（ SRM/MRM ）2．开发一个 SRM 方法3．内标4．PK/LC/MS/MS 药物代谢动力学的LC/MS/MS 的反相液相色谱的方法开发5．样品制备6．标准和标准曲线的准备a) 做标准曲线的步骤b) 标准曲线的稀释方案Scheme的举例c) 标准曲线的运行d) 进行标准品和样品的随机化e) 系统运行的实用性f) “QCs”质量控制7．相关的 PK 资源8．定量的技巧 Tips质谱定量的原则02—— 质谱定量的简介和LC/MS 监测的模式简介本教程主要用于：使用质谱作小分子药代动力学分析，即PK/MS。除此之外，这些同样的原则也可用于生物基质中肽和蛋白的定量。传统上，在使用现代质谱定量之前， 定量是用 HPLC 高效液相色谱和 UV 紫外检测器实现的。 HPLC 药代动力学分析建立在保留时间、峰面积和紫外光谱性质的基础上的。 HPLC 方法的缺点是灵敏度不够、缺乏特异性。我们已经看到一些实例，一个化合物的确已经代谢了，然而保留时间和紫外光谱上，母离子和代谢物无法区分。 这种缺少特异性的分析时不时会误导研究者。所以在药代动力学分析中，基于质谱的表征现在是一种新型的重要的工具。质谱定量中已经被广泛接受的方式是MS/MS 定量。这种定量常通过三级四极杆或离子阱质谱实现。要求使用MS/MS 的原因是：许多化合物有同样的质量。当使用第一个维度即单级质谱MS 去定量时， 也会缺乏特异性， 尤其是对于像血液那样的复杂的基质。第二个维度的MS（即 MS/MS）在大多数情况下，能够提供唯一的断裂。 合并特异的母离子质量和唯一的碎片离子信息，可以选择性地监测被定量的化合物。下面我们将讨论获得和可视化LC/MS 数据的方法。获得和可视化 LC/MS 的数据，或称为：质谱数据如何在一个LC/MS 实验中表达？典型的方法， 质谱被设置为扫描特定的质量范围。在全扫描分析中， 质量扫描范围较宽；在选择离子监测SIM 时，质量扫描范围较窄。依赖于扫描的类型，一个独立的质量扫描时间可以从10 ms 到 5 秒。在一次 LC/MS 分析中可获得许多个扫描。 LC/MS 数据的表示方法为：把每个质量扫描的离子流信息叠加，画出随时间变化的总离子流， 横轴是时间， 纵轴是强度。 总离子流图非常像HPLC 的紫外图，见图 1。。下面我们将讨论各种扫描的模式，和这些模式同质谱定量的关系。最常见的 LC/MS...
