1 实 验 一 植 物 叶 绿 素 含 量 的 测 定 （ 分 光 光 度 法 ） (张 宪 政 ， 1992) 一 、 原 理 根 据 叶 绿 体 色 素 提 取 液 对 可 见 光 谱 的 吸 收 ， 利 用 分 光 光 度 计 在 某 一 特 定 波 长 测 定 其 吸 光度 ， 即 可 用 公 式 计 算 出 提 取 液 中 各 色 素 的 含 量 。 根 据 朗 伯 —比 尔 定 律 ， 某 有 色 溶 液 的 吸 光 度A 与 其 中 溶 质 浓 度 C 和 液 层 厚 度 L 成 正 比 ， 即 A＝ αCL 式 中 ： α 比 例 常 数 。 当 溶 液 浓 度 以 百分 浓 度 为 单 位 ， 液 层 厚 度 为 1cm时 ， α 为 该 物 质 的 吸 光 系 数 。 各 种 有 色 物 质 溶 液 在 不 同 波 长下 的 吸 光 系 数 可 通 过 测 定 已 知 浓 度 的 纯 物 质 在 不 同 波 长 下 的 吸 光 度 而 求 得 。 如 果 溶 液 中 有 数种 吸 光 物 质 ， 则 此 混 合 液 在 某 一 波 长 下 的 总 吸 光 度 等 于 各 组 分 在 相 应 波 长 下 吸 光 度 的 总 和 。这 就 是 吸 光 度 的 加 和 性 。今 欲 测 定 叶 绿 体 色 素 混 合 提 取 液 中 叶 绿 素 a、b 和 类 胡 萝 卜 素 的 含 量 ，只 需 测 定 该 提 取 液 在 三 个 特 定 波 长 下 的 吸 光 度 A， 并 根 据 叶 绿 素 a、 b 及 类 胡 萝 卜 素 在 该 波 长下 的 吸 光 系 数 即 可 求 出 其 浓 度 。 在 测 定 叶 绿 素 a、 b 时 为 了 排 除类 胡 萝 卜 素 的 干扰， 所用 单 色光 的 波 长 选择叶 绿 素 在 红光 区的 最大吸 收 峰。 高等 植 物 中 叶 绿 素 有 两种 ： 叶 绿 素a 和b， 两者均易溶 于 乙醇、 乙醚、 丙酮和 氯仿。 叶 绿 素a 和 叶 绿 素b 的 比 值反映植 物 对 光 能利 用 效率的 大小， 比 值高则 大， 则 反之。 二、 材料、 仪器设备及 试剂 试剂： 1） 95%乙醇（ 或80%丙酮） 三 、 实 验 步骤 称取 剪碎的 新鲜样品 0.2～0.3g， 加 乙醇10m l， 提 取 直至无绿 色 为 止。 把叶 绿 体 ...
