杨方华定性免疫学检验的性能验证与质量控制CNAS-CL39：2012《医学实验室质量和能力认可准则》在临床免疫学检验领域的应用说明：检验方法和程序的分析性能验证内容应参考试剂盒说明书上明确标示的性能参数进行验证，至少应包括：检出限、符合率（采用国家标准血清盘或临床诊断明确的阴阳性样品各20份或与其他分析方法比对），精密度（包括重复性和批间精密度）；并应明确检验项目的预期用途，如筛查、诊断、确认。一、定性免疫试验的性能验证ISO15189实验室认可系列培训讲座辽宁中医药大学附属医院临床检验中心2筛查试验诊断试验确认实验C50C5C95性能验证相关概念ISO15189实验室认可系列培训讲座辽宁中医药大学附属医院临床检验中心3一份样本，在多次重复实验中各有50%的几率获得阳性或阴性的结果时该分析物的浓度。对特定试剂，C50一旦确定，是恒定不变的。临界点（C50）浓度的定义C50ISO15189实验室认可系列培训讲座辽宁中医药大学附属医院临床检验中心4一份样本，在多次重复实验中有95%的几率获得阴性结果时该分析物的浓度。C5浓度的定义C5ISO15189实验室认可系列培训讲座辽宁中医药大学附属医院临床检验中心5一份样本，在多次重复实验中有95%的几率获得阳性结果时该分析物的浓度。C95浓度的定义C95ISO15189实验室认可系列培训讲座辽宁中医药大学附属医院临床检验中心6质控品：商用或自备，含阳性和阴性。C50和C5（C50-20%）及C95（C50+20%）浓度样本：用于重复性及最低检出限验证，不少于40次检测量。临床样本或血清盘：用于准确性验证，不少于50份阳性和阴性样本。性能验证的样本准备ISO15189实验室认可系列培训讲座辽宁中医药大学附属医院临床检验中心7纯定性试验：采用浓度接近临界值的分析物作为检测材料，不宜采用阴性低值或强阳性样本来评价定性检测方法的不精密度。量值化定性试验：以COI（cut-offIndex）或S/CO比值作为分析方法的精密度评价指标。（一）不精密度的验证ISO15189实验室认可系列培训讲座辽宁中医药大学附属医院临床检验中心8定性测定精密度分析质量指标为C5-C95浓度区间（亦即“灰区”），这一区间范围≤C50±20%。纯定性测定不精密度的评估方法ISO15189实验室认可系列培训讲座辽宁中医药大学附属医院临床检验中心9分析物浓度接近临界值时的不精密度曲线ISO15189实验室认可系列培训讲座辽宁中医药大学附属医院临床检验中心10两种不同方法的不精密度曲线比较ISO15189实验室认可系列培训讲座辽宁中医药大学附属医院临床检验中心11检测试剂或系统的说明书可能会注明分析物的临界浓度，但需验证。如果临界浓度未知，则可以将阳性样本进行一系列稀释，然后将他们进行重复检测以确定能够获得50%阳性和50%阴性结果的那个稀释度，这一稀释度的分析物浓度即为临界点（C50）。如何获得“临界点（C50）”ISO15189实验室认可系列培训讲座辽宁中医药大学附属医院临床检验中心12制备评价用样本制备3份样本：一份浓度为C50，一份为C50+20%，一份为C50-20%。每份样本的体积需保证40次或更多次重复检测的需要。评价方法每份样本检测40次，确定每一份样本结果为阳性和阴性的百分比。纯定性试验不精密度评价步骤ISO15189实验室认可系列培训讲座辽宁中医药大学附属医院临床检验中心13-20%～+20%浓度范围在C5-C95区间之内；用该方法检测，浓度超过C50±20%的样本检测结果不一致；此结论错误率5%，需使用更宽浓度范围的样本（如±30%）进行另外的试验。不精密度评价结果判断-1ISO15189实验室认可系列培训讲座辽宁中医药大学附属医院临床检验中心14-20%～+20%浓度范围包含了C5-C95区间；用该方法检测，浓度超过C50±20%的样本检测结果一致不精密度评价结果判断-2ISO15189实验室认可系列培训讲座辽宁中医药大学附属医院临床检验中心15用该方法检测，C50+20%的样本检测结果一致，C50-20%的样本不一定能得到一致结果；需要用低于C50更大百分率浓度的样本（如-30%）进行补充试验。不精密度评价结果判断-3ISO15189实验室认可系列培训讲座辽宁中医药大学附属医院临床检验中心16用该方法检测，C50-20%的样本检测结果一致，C50+20%的样本不一定能得...
