专题 5 DNA 与蛋白质技术课题 5
3血红蛋白的提取和分离一、【课题目标】（一）知识与技能1、尝试从血液中提取和分离血红蛋白2、了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理（二）过程与方法体验血红蛋白提取和分离的实验的严格要求，注意按照操作提示进行相关步骤（三）情感、态度与价值观初步形成科学的思维方式，发展科学素养和人文精神二、【课题重点】凝胶色谱法的原理和方法三、【课题难点】样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填四、【教学方法】启发式教学五、【教学工具】多媒体课件六、【教学过程】（一）引入新课蛋白质是生命活动的主要承担者，是细胞内含量最高的有机化和物
对蛋白质的研究有助于人们对生命过程的认识和理解
所以需要从细胞中提取蛋白质进行研究
怎样提取蛋白质呢
（二）进行新课1．基础知识蛋白质的物化理性质：形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别，由此提取和分离各种蛋白质
1．1 凝胶色谱法（分配色谱法）：（1）原理：（图 5－13a）分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢
（2）凝胶材料：多孔性，多糖类化合物，如葡聚糖、琼脂糖
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（3）分离过程：（图 5－13b）混合物上柱→洗脱→大分子流动快、小分子流动慢→收集大分子→收集小分子＊洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动
1．2 缓冲溶液（1）原理：由弱酸和相应的强碱弱酸盐组成（如 H2CO3－NaHCO3，HC－NaC，NaH2PO4/Na2HPO4等），调节酸和盐的用量，可配制不同 pH 的缓冲液
（2）缓冲液作用：抵制外界酸、碱对溶液 pH 的干扰而保持 pH 稳定
1．3 凝胶电泳法：（1）原理：不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同，在电场中受到的作
