化学与材料工程学院环境监测分析实验报告实验名称：高效液相色谱分析苯 - 甲苯混合物 专业班级：应化 13 学号：名：指导教师：实验地点：敬行楼 A210 实验日期：2016 年 11 月 28 日高效液相色谱实验一、实验目的1.了解 HPLC 仪器的基本构造和工作原理，掌握 HPLC 的基本操作；2．学习苯-甲苯混合物的定性分析方法；3.评价色谱柱柱效；4.了解色谱定量操作的主要方法以及各自特点；5.学习未知样品的定量分析方法。二、实验原理不同组分因在互不相溶的流动相与固定相中的分配比不同，当两相做相对运动时，组分在两相之间反复进行多次分配，最终实现不同组分的分离。色谱仪器的构成：包括高压输液系统、进样系统、分离系统，检测系统等1.色谱定性分析方法a 保留时间定性 b 峰高增量定性2.色谱定量分析方法a 归一化法,要求所有组分必须全部出峰。b 标准曲线法(外标法)。简单、方便,结果受到操作技术因素以及具体色谱条件影响较大。三、仪器与试剂LC-1602A 型高效液相色谱仪、甲醇(色谱纯)、苯、甲苯、苯一甲苯四、高效液相色谱仪操作步骤1. 流动相的预处理甲醇溶液，用 0.45ym 有机滤膜过滤，超声波清洗器脱气 10〜20min,装入流动相贮液瓶。2. 准备苯-甲苯混合试样和苯、甲苯标样3. 高效液相色谱仪操作a 依次高压输液泵和检测器电源开关；b 打开色谱工作站，在仪器控制面板中，设置波长，并开灯；c 打开三通阀，在仪器控制面板中，设置流速为 5ml/min,启动高压泵，排除流路中的气泡。排气结束后，点击停止按钮，停止高压泵。d 关闭三通阀，设置最小压力(0.1)和最大压力(20)，并设置实验需要的流速(0.5ml/min)，启动高压泵。e 用平头微量注射器洗涤进样口后，取试液 30yL,将进样阀柄置于“Load”位置时注入样品，转动阀柄至“Inject”位置，此时软件自动进入“采集数据”模式。注意！平头微量注射器用甲醇清洗 3 次后，再用试液清洗 3 次，避免气泡。f 待所有色谱峰流出完毕后，按“停止采集”键，保存数据。g 点击谱图处理中的定量结果，记录组分的保留时间以及峰面积、峰高等色谱信息。注意！注射器进不同样品前，使用专用清洗注射器在进样阀的“Load”和“Inject”位置，用流动相清洗几次。注意！注射器进不同样品前，使用专用清洗注射器在进样阀的“Load”和“Inject”位置，用流动相清洗几次。4．结束工作所有样品分析完毕后，流动相继续流动 10〜20min，至基线稳定。关闭检测器，按“Stop”停泵。关闭...
