行 者 【 转 载 】 生 物 信 息 学 名 词 解 释 ----这 个 比 较 全 什 么 是 高 通 量 测 序
高 通 量 测 序 技 术 ( High-throughput sequencing, HTS) 是 对 传 统 Sanger 测 序 ( 称 为 一代 测 序 技 术 ) 革 命 性 的 改 变 , 一 次 对 几 十 万 到 几 百 万 条 核 酸 分 子 进 行 序 列 测 定 , 因 此 在 有 些 文 献中 称 其 为 下 一 代 测 序 技 术 (next generation sequencing, NGS )足 见 其 划 时 代 的 改 变 , 同 时高 通 量 测 序 使 得 对 一 个 物 种 的 转 录 组 和 基 因 组 进 行 细 致 全 貌 的 分 析 成 为 可 能 , 所 以 又 被 称 为 深度 测 序 (Deep sequencing)
什 么 是 Sanger 法 测 序 ( 一 代 测 序 ) Sanger 法 测 序 利 用 一 种 DNA 聚 合 酶 来 延 伸 结 合 在 待 定 序 列 模 板 上 的 引 物
直 到 掺 入 一 种 链终 止 核 苷 酸 为 止
每 一 次 序 列 测 定 由 一 套 四 个 单 独 的 反 应 构 成 , 每 个 反 应 含有 所 有 四 种 脱氧核苷 酸 三磷酸 (dNTP), 并混入 限量 的 一 种 不同 的 双脱氧核 苷 三磷酸 (ddNTP)
由 于ddNTP 缺乏延 伸 所 需要的 3-OH 基 团, 使 延 长的 寡聚 核 苷 酸 选择性 地在 G、A、T 或C 处终 止
终 止 点由 反 应 中 相应 的 双脱氧而定
每 一 种 dNTPs 和 ddNTPs 的 相对 浓度 可 以 调整, 使 反 应 得 到 一组 长几 百 至几