缓冲液的配制方法

核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法 50×TAE Buffer (pH8.5) 组份浓度 2 M Tris-醋酸，100 mM EDTA 配制量 1 L 配制方法 1.称量下列试剂，置于 1 L 烧杯中。 Tris 242 g Na2EDTA·2H2O 37.2 g 2.向烧杯中加入约 800 ml 的去离子水，充分搅拌溶解。 3.加入 57.1 ml 的乙酸，充分搅拌。 4.加去离子水将溶液定容至 l L 后，室温保存。 10×TBE Buffer (pH8.3) 组份浓度 890 mM Tris-硼酸，20 mM EDTA 配制量 1 L 配制方法 l.称量下列试剂，置于 l L 烧杯中。 Tris 108 g Na2EDTA·2H2O 7.44 g 硼酸 55 g 2.向烧杯中加入约 800 ml 的去离子水，充分搅拌溶解。 3.加去离子水将溶液定容至 l L 后，室温保存。 10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer 组份浓度 200 rnM MOPS，20 mM NaOAc，10 mM EDTA 配制量 1 L 配制方法 1.称 41.8 g MOPS，置于 1 L 烧杯中。 2.加约 700 ml DEPC 处理水，搅拌溶解。 3.使用 2 N NaOH 调节 pH 值至 7.0。 4.再向溶液中加入下列试剂。 1 M NaOAc(DEPC处理) 20 ml 0.5 M EDTA(pH8.0)(DEPC 处理) 20 ml 5.用 DEPC 处理水将溶液定容至 1 L。 6.用 0.45 m 滤膜过滤除去杂质。 7.室温避光保存。 注：溶液见光或高温灭菌后会变黄。变黄时也可使用，但变黑时不要使用。 溴乙锭 (10 mg/ml) 组份浓度 10 mg/ml 溴乙锭 配制量 100 ml 配制方法 1.称量 1 g 溴乙锭，加入到 100 ml 容器中。 2.加入去离子水 100 ml，充分搅拌数 h 完全溶解溴乙锭。 3.将溶液转移至棕色瓶中，室温避光保存。 4.溴乙锭的工作浓度为 0.5 g/ml。 注意：溴乙锭是一种致癌物质，必须小心操作。 Agarose 凝胶 配制方法 1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液(通常是 0.5×TBE 或 1×TAE)。 2.根椐制胶量及凝胶浓度，准确称量琼脂糖粉，加入适当的锥形瓶中。 3.加入一定量的电泳缓冲液(总液体量不宜超过锥形瓶的 50%容量)。 注：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须统一。 4.在锥形瓶的瓶封上保鲜膜，并在膜上扎些小孔，然后在微波炉中加热熔化琼脂糖。加热过程中，当溶液沸腾后，请戴上防热手套。小心摇动锥形瓶。使琼脂糖充分均匀熔化。此操作重复数次，直至琼脂糖完全熔化。必须注意，在微波炉中加热时间不宜过长，每次当溶液起泡沸腾时停止加热，否则会引起溶液过热暴沸，造成琼脂糖凝...