07/1 Ver.1 Page 1 Ax y Prep总RNA小量制备试剂盒 本试剂盒用于从各种动物组织、植物组织、细胞、细菌、酵母和丝状真菌中提取总RNA。提取的总RNA 分子完整、纯度高，适用于Northern Blot 、RT-PCR、体外翻译、Primer Extension、S1 核酸酶作图、RNase 保护测定、构建cDNA 文库等各种分子生物学实验。 一、试剂盒组成、贮存、稳定性 Cat. No. AP-MN-MS-RNA-4AP-MN-MS-RNA-50AP-MN-MS-RNA-250Kit size 4 preps 50 preps 250 preps Spin/vac mini column 4 50 250 2 ml Microfuge tube 4 50 250 1.5 ml Microfuge tube 8 100 500 Buffer R-Ⅰ 3 ml 25 ml 125 ml Buffer R-Ⅱ 1 ml 10 ml 50 ml Buffer W1A concentrate 2.4 ml 24 ml 120 ml Buffer W2 concentrate 2.4 ml 24 ml 2×72 ml Buffer TE 1 ml 6 ml 30 ml Protocol manual 1 1 1 Spin/vac mini column：小量制备管。 Buffer R-Ⅰ：细胞裂解液。室温密闭贮存。 Buffer R-Ⅱ：中和液。室温密闭贮存。 Buffer W1A concentrate：洗涤液。使用前，根据瓶上指定的体积加入乙醇，混合均匀，室温密闭贮存。可用无水乙醇或95%乙醇。 Buffer W2 concentrate：去盐液。使用前，根据瓶上指定的体积加入乙醇，混合均匀，室温密闭贮存。可用无水乙醇或95%乙醇。 Buffer TE ：洗脱液。10 mM Tris-HCl，0.1 mM EDTA，pH 7.5。室温密闭贮存。 二、注意事项 Buffer R-Ⅰ和Buffer W1A 含刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套和眼镜，避免沾染皮肤、眼睛和衣服，谨防吸入口鼻。若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医疗咨询。 三、实验准备 1. 第一次使用时，在Buffer W1A concentrate 和Buffer W2 concentrate中按 试剂瓶上指定体积加入无水乙醇或95%乙醇。 2. 所 有 试剂用DEPC处 理过 的溶 剂配 制。请 选 用RNase-free枪 头 和离 心 管，以 避免提取过 程 中RNA被 RNase降 解。 07/1 Ver.1 Page 2 四、操作步骤 不同的样品提取总RNA的操作中略有区别，具体步骤分述如下： 【从动物组织中提取总R N A 】 1. 取20-40 mg组织，转移至预冷的研钵中，加液氮研磨成粉末。 *请按下面说明使用组织的量： RNA 丰富的组织 (如肝脏) 不超过30 mg RNA 含量低的组织 (如肌肉) 不超过100 mg 当使用的组织量小于20 ...
