流式细胞仪检测细胞周期操作步骤取对数生长期的 A549 细胞，按 1X106cells/mL 以 1mL 接种于 100mm培养皿内
24h 后，进行所需的处理（比如加药,照射）
特定时间后终止培养，进行下一步的实验
收集原培养液，洗后的 PBS 和消化后的细胞，将三者混匀放入 15ml离心管中
1000rpm 离心 5min（短时低速离心）
弃上清，用 1
5ml 预冷 PBS，1000rpm 离心 5min 后去除 PBS 和细胞悬液内的细胞碎片
5ml 预冷 PBS,在涡旋状态下加入 3
5ml 无水乙醇，混匀后，于 4°C 固定 30min,或-20°C 长期保存
1000r/min,离心 5min将乙醇吸除，加 PBS 清洗混匀I1000r/min,5min 再离心一遍，将残留在细胞上的乙醇除去I吸除离心管内 PBS，加入 200ulPBS 和 2ul 的 RNA 酶（0
25mg/ml）（37°C 下孵育 30min）I加入 0
5ml 的 50ug/ml 的 PI 溶液室温下避光染色 30minI将离心管内的细胞过滤（300um 尼龙网膜）至含有 PBS 的 EP 管中（PI 具有很强的粘附性，容易使细胞聚团），标记 EP 管I提前一天网上预约I开机（先开仪器后开软件）I流式细胞仪的结构一般分为 5 部分：①流动室及液流驱动系统；②激光光源及光束成形系统；③光学系统；④信号检测、存贮、显示、分析系统；⑤细胞分选系统
I检测前先涡旋使细胞混匀悬浮呈单个细胞，然后插入流式细胞仪上结果分析Modfit流动室内充满鞘液，细胞排成单列由喷嘴中心喷出，形成细胞液柱
液柱与激光束相交，细胞上的荧光染料被激发产生荧光（488nm 激发光源）
荧光信号变成电信号输出到计算机，软件分析（荧光染料和细胞DNA 分子特异性结合，可以检测出细胞周期各时相细胞比例）
