ELISA 检 测 方 法 操 作 要 点 1 标 本 的 采 取 和 保 存 可 用 作 ELISA 测 定 的 标 本 十 分 广 泛 , 体 液 ( 如 血 清 ) 、 分 泌 物 ( 唾 液 ) 和 排 泄 物 ( 如 尿 液 、 粪 便 )等 均 可 作 标 本 以 测 定 其 中 某 种 抗 体 或 抗 原 成 份 。 有 些 标 本 可 直 接 进 行 测 定 ( 如 血 清 、 尿 液 ) , 有些 则 需 经 预 处 理 ( 如 粪 便 和 某 些 分 泌 物 ) 。 大 部 分 ELISA 检 测 均 以 血 清 为 标 本 。 血 浆 中 除 尚 含 有纤 维 蛋 白 原 和 抗 凝 剂 外 , 其 他 成 份 均 同 等 于 血 清 。 制 备 血 浆 标 本 需 借 助 于 抗 凝 剂 , 而 血 清 标 本 只要 待 血 清 自 然 凝 固 、 血 块 收 缩 后 即 可 取 得 。 除 特 殊 情 况 外 , 在 医 学 检 验 中 均 以 血 清 作 为 检 测 标 本 。在 ELISA 中 血 浆 和 血 清 可 同 等 应 用 。 血 清 标 本 可 按 常 规 方 法 采 集 , 应 注 意 避 免 溶 血 , 红 细 胞 溶 解时 会 释 放 出 具 有 过 氧 化物 酶活性的 物 质, 以 HRP 为 标 记的 ELISA 测 定 中 , 溶 血 标 本 可 能会 增加非特 异性显色。 血 清 标 本 宜在 新鲜时 检 测 。 如 有 细 菌污染, 菌体 中 可 能含 有 内源性HRP, 也会 产生假阳性反应 。 如 在 冰箱中 保 存 过 久, 其 中 的 可 发生聚合, 在 间接 法 ELISA 中 可 使本 底加深。 一般说来, 在 5 天内测 定的 血 清 标 本 可 放 置于 4℃, 超过 一周测 定 的 需 低温冰存 。 冻结血 清 融解 后 , 蛋 白 质局部 浓缩 , 分布不均 , 应 充分 混匀宜轻缓, 避 免 气泡, 可 上下颠倒混和 , 不要 在 混匀器上强烈振荡。 混浊或 有沉淀的 血 清 标 本 应 先离心或 过 滤, 澄清 后 再检 测 。 反复冻融会 使抗 体 效价跌落, 所以 测 抗 体 的 血清 标 本 如 需 保 存 作 多次检 测 , 宜少量分 装冰存 。 保 存 血 清 自 采 集 时 就应 注 意 无菌操 作 , 也可...