专题一基因工程

HalHI£coRIBamWIEcoRIBamWIP5Ei55Kda 野生型腺病毒 DNAEcoRIHalDI人体 DNA 片段乙专题一基因工程练习一1.正常细胞中含有抑癌的 P53 基因，若它失活而不能表达，则基因突变的细胞易形成肿瘤。基因治疗肿瘤是根本的方法，腺病毒以其嗜好增殖细胞和对人体基本无害而成为良好的基因载体。野生型腺病毒含有抑制 P53 基因活性的 55Kda 基因，以及病毒复制基因 E1,因此需要重新构建有疗效的、安全的腺病毒。图甲、乙中箭头所指为相应限制酶切点。(1) 构建重组腺病毒时，限制酶最好选择，这样既可以去除基因以防止病毒复制后损伤健康细胞，同时还能破坏基因以防止其。(2) 将目的基因与腺病毒重组时，重组的成功率较低，依然还有大量非重组的野生型病毒的 DNA,这是因为。⑶ 某 DNA 分子片段含有 1000 个碱基对(即 bp)。经扩增后，通过只用限制酶 EcoRI 与同时用 EcoRI和 Hallll 两种方法切割，其电泳结果如图丙所示，可推断限制酶 Hallll 在该 DNA 片段上的切割点有个。2.某一质粒载体如图所示，外源 DNA 插入 Ampr 或 Tetr 中会导致相应的基因失活(Ampr 表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr 表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用 BamHI 酶切后，与用 BamHI 酶切获得的目的基因混合，加入 DNA 连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌，结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题：(1)_________________________________________________________________________________________质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有(答出两点即可)。而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是；并且和的细EcoRI 两种酶丙胞也是不能区分的，其原因是。在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌单菌落，还需使用含有的固体培养基。(3)________________________________________________________________________________________基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其 DNA 复制所需的原料来自。3.(2015•全国卷 I)HIV 属于逆转录病毒，是艾滋病的病原体。回答下列问题：(1) 用...