精品文档---下载后可任意编辑18O 结合二甲基标记的二级质谱定量方法应用于肝癌蛋白质组讨论中期报告本讨论旨在应用 18O 结合二甲基标记的二级质谱定量方法比较肝癌组织与正常组织的蛋白质表达水平，并探究其与肝癌发生进展的相关性。本篇文章为中期报告，介绍了讨论的进展情况。讨论方法：1.患者选择及样品采集：选取 15 例肝癌患者和 15 例无肝癌的正常肝组织作为讨论对象，采纳手术切除的方式猎取组织样本，并进行组织学鉴定和病理学分级。2.蛋白质样品制备：通过荧光差异凝胶电泳（DIGE）将标准和样品的蛋白质分别染色，然后将它们混合后电泳进行分离，将识别出的差异蛋白质提取出来，酸水解并标记。3.二甲基标记：将酸水解后的蛋白质加入 18O 水瓶中，使其以 H2O和 H218O 进行交换。18O 水被右侧乙酰化的蛋白质二甲基化，左侧与h18O 结合。4.二级质谱定量：将标记后的蛋白质进行质谱分析并量化，比较肝癌和正常组织的蛋白质表达水平，筛选出差异蛋白质。讨论结果：1.通过 DIGE 和二级质谱定量法共识别到 132 个蛋白质，其中 29个蛋白质表达量发生明显变化，其中有 13 个蛋白质表达水平在肝癌组织中显著高于正常组织，16 个蛋白质表达水平在肝癌组织中显著降低。2.这些差异表达的蛋白质包括了许多已知与肝癌发生进展相关的蛋白质，如丝氨酸蛋白酶、甲状腺激素受体、胶原蛋白等。结论：本讨论表明，18O 结合二甲基标记的二级质谱定量方法可用于比较不同样品间蛋白质表达水平的变化，是一种快速、灵敏、准确的蛋白质组学讨论方法，这对于寻找肝癌发生进展的有关蛋白质、预测肝癌的进展和提高肝癌的早期诊断具有重要的意义。
