精品文档---下载后可任意编辑使用 hTERT 启动子联合 RNAi 靶向逆转乳腺癌 MCF-7/ADR 的耐药性的开题报告一、背景及讨论目的乳腺癌是女性最常见的肿瘤之一，化疗是其主要治疗方式之一。然而，乳腺癌患者中耐药性的存在给化疗带来了极大的挑战。因此，讨论如何解决耐药性的问题是非常重要的。在一系列的体内外讨论中，Telomerase reverse transcriptase (hTERT)启动子的增强活性已被证明在癌细胞中高表达。同时，hTERT启动子也是一个适合于癌症治疗的潜在经典和新兴的靶标。因此，我们选择利用 hTERT 启动子联合 RNAi 靶向逆转乳腺癌 MCF-7/ADR 的耐药性。本讨论的目的是通过 hTERT 启动子联合 RNAi 技术调控耐药性相关基因的表达，增强化疗对 MCF-7/ADR 细胞的敏感性，为进一步讨论乳腺癌耐药性的克服提供理论和实验基础。二、讨论方法1. 构建 hTERT 启动子联合 RNAi 质粒设计具有目的性的 hTERT 启动子相关 siRNA，克隆到质粒中，转染到 MCF-7/ADR 细胞中。检测表达的 RNA 干扰效果。2. 检测获得细胞的 hTERT 启动子的高表达和 RNAi 技术的效果通过实时荧光定量 PCR 和 Western blotting 检测获得细胞的hTERT 启动子的高表达和 RNAi 技术对耐药相关基因的干扰效果。3. 药物敏感性测定MTT 法检测 MCF-7/ADR 细胞对多种抗肿瘤药物的敏感性变化，评估 hTERT 启动子联合 RNAi 技术对其敏感性的影响。4. 流式细胞术使用荧光型 Annexin-v / PI 双染色液进行细胞凋亡分析，探讨hTERT 启动子联合 RNAi 技术对 MCF-7/ADR 细胞凋亡的影响。三、预期结果及意义精品文档---下载后可任意编辑我们估计 hTERT 启动子联合 RNAi 技术可以调控耐药性相关基因的表达，促进化疗对 MCF-7/ADR 细胞的敏感性，并且可以诱导细胞凋亡。此外，本讨论结果为进一步讨论乳腺癌耐药性的克服提供了新思路和实验基础。
