介导性shRNA 能抑制肺癌细胞中livin 沉默基因的表达从而促进SGC-7901 细胞凋亡 背景—由于肿瘤细胞抑制凋亡增殖,特定凋亡的抑制因素会对于发展新的治疗策略提供一个合理途径
Liv in 是一种凋亡抑制蛋白家族成员,在多种恶性肿瘤的表达中具有意义
但是, 在有关胃癌方面没有可利用的数据
在本研究中,我们发现liv in 基因在人类胃癌中的表达并调查了介导的shRNA 能抑制肺癌细胞中liv in 沉默基因的表达,从而促进SGC-7901 细胞凋亡
方法—mRNA 及蛋白质liv in 基因的表达用逆转录聚合酶链反应技术及西方吸干化验进行了分析
小干扰RNA 真核表达载体具体到liv in 基因采用基因重组、测序核酸
然后用Lipofectamin2000 转染进入 SGC-7901 细胞
逆转录聚合酶链反应技术和西方吸干化验用来验证的liv in 基因在SGC-7901 细胞中使沉默基因生效
所得到的稳定的复制品用G418 来筛选
细胞凋亡用应用流式细胞仪(FCM)来评估
细胞生长状态和 5-FU 的50%抑制浓度(IC50)和顺铂都由MTT 比色法来决定
结果—liv in mRNA 和蛋白质的表达检测 40 例中有19 例(47
5%)有胃癌和SGC-7901 细胞
没有liv in 基因表达的是在肿瘤邻近组织和良性胃溃疡病灶
相关发现在liv in 基因的表达和肿瘤的微小分化和淋巴结转移一样(P < 0
4 个小干扰RNA 真核表达矢量具体到基因重组的liv in 基因建立
其中之一,能有效地减少 liv in 基因的表达,抑制基因不少于70%(P < 0
重组的质粒被提取和转染到胃癌细胞
G418 筛选所得到的稳定的复制品被放大讲究
当 liv in 基因沉默,胃癌细胞的生殖活动明显低于对照组(P < 0
研究还表明,IC50