单克隆抗体和多克隆抗体有什么区别? 单克隆抗体由同一株B 细胞克隆分泌，编码该抗体的基因序列完全一致。只识别单一抗原表位。 多克隆抗体则是混合体，有动物体内所有可识别该抗原的B 细胞分泌。可识别该抗原上的不同抗 原表位。 单克隆抗体的优点与局限性：单克隆抗体和多克隆抗体各有其优点和局限性，只有对它们有全面 的了解，才能根据不同应用领域的要求，正确的选择和应用。 1）单克隆抗体的优点： （1）杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代，只要不发生细胞株的基因突变，就可以不断 的生产高特异性、高均一性的抗体。 （2）可以用相对不纯的抗原，获得大量高度特异的、均一的抗体。 （3）由于可能得到“无限量”的均一性抗体，所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方 法，如 IRMA 和ELISA 等。 （4）由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能，可用于体内的放射免疫显像和免疫导向 治疗。 2）单克隆抗体的局限性： (1）单克隆抗体固定的亲和性和局限的生物活性限制了它的应用范围。由于单克隆抗体不能进 行沉淀和凝集反应，所以很多检测方法不能用单克隆抗体完成。、 (2)单克隆抗体的反应强度不如多克隆抗体。 （3）制备技术复杂，而且费时费工，所以单克隆抗体的价格也较高。 单克隆抗体的制备过程 过程 1）免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c 小鼠。免疫的方法取决于所用 抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备，也可采用脾内直接免疫法。 2）骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前，骨髓瘤细胞应经过含 8-AG 的培养基筛选，防止细胞发 生突变恢复 HGPRT 的活性（恢复 HGPRT 的活性的细胞不能在含 8-AG 的培养基中存活）。骨髓瘤 细胞用10%小牛血清的培养液在细胞培养瓶中培养，融合前24h 换液一次，使骨髓瘤细胞处于对 数生长期。 3）细胞融合的关键: 1 技术上的误差常常导致融合的失败。例如，供者淋巴细胞没有查到免疫应答。这必然要失败的 2 融合试验最大的失败原因是污染，融合成功的关键是提供一个干净的环境，以及适宜的无菌操 作技术。 4）阳性克隆的筛选 应尽早进行。通常在融合后10 天作第一次检测，过早容易出现假阳性。检 测方法应灵敏、准确、而且简便快速。具体应用的方法应根据抗原的性质，以及所需单克隆抗体 的功能进行选择。常用的方法有 RIA 法、 ELISA 法和免疫荧光法等。其中ELISA 法最简便，RIA 法最准确。阳性克隆的筛选应进...
