精品文档---下载后可任意编辑RNAi 技术抑制人脐带间充质干细胞 B7-H1 基因表达的讨论的开题报告一、讨论背景近年来,人体间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)因其广泛应用于再生医学和组织工程学等领域而备受瞩目。然而,在逆转录望远镜下,hUC-MSCs表达的 B7-H1 蛋白表面分子被发现会抑制人体的免疫应答。因此,讨论如何抑制该基因表达,以提高其单倍型相容性和生物稳定性,改善其临床应用效果,是当前热门的讨论方向之一。RNAi 技术具有高效、特异、可逆和早期动物讨论结果转化到临床的优点,因此是一种值得讨论的选择性基因靶向治疗方法。二、讨论目的本文旨在通过 RNAi 技术抑制 hUC-MSCs 中 B7-H1 基因的表达,进一步探究 RNAi 技术在 hUC-MSCs 治疗方面的应用前景。三、讨论方法通过计算机筛选阶段性设计 RNAi 突变体,采纳脂质体介导的 RNA干扰技术,向 hUC-MSCs 中导入 RNAi,点突变体浓度为 100nM。RNA干扰后,采纳实时荧光定量 PCR(q-PCR)和 Western blotting 检测B7-H1 在细胞水平上的表达。最后,通过流式细胞分析仪(FACS)合适的参数,设计相应的实验条件,检测 RNAi hUC-MSCs 的免疫学功能。四、讨论意义实验结果将为进一步开发 RNAi 技术在治疗 hUC-MSCS 相关疾病中的临床应用提供有力的依据,为消除细胞活性低下、单倍型相容性不良和免疫应答等临床问题提供新的方案。