糖的测定方法有很多,大致可分为三类 1.物理法,(1.旋光法, 2 .折光法, 3.比重法,) 2.物理化学法,(1.点位法, 2极普法, 3.光度法, 4.色谱法) 3.化学方法,(1.斐林氏法. 2.高锰酸钾法. 3.碘量法. 4.铁氰化钾法. 5.蒽铜比色法. 6.咔唑比色法) 共计三大种,在测定其他碳水化合物时,往往是使其水解为糖再进行测定。 一. 总糖的测定 食品中的总糖主要指具有还原性的葡萄糖,果糖,戊糖,乳糖和在测定条件下能水解为 还原性的单糖的蔗糖(水解后为1分子葡萄糖和1分子果糖),麦芽糖(水解后为2分子葡萄糖)以及可能部分水解的淀粉(水解后为2分子葡萄糖)。还原糖类之所以具有还原性是由于分子中含有游离的醛基( -CHO)或酮基(=C=O)。 测定总糖的经典化学方法都是以其能被各种试剂氧化为基础的。这些方法中,以各种根据斐林氏溶液的氧化作用的改进法的应用范围最广。在这里我们主要给大家介绍铁氰化钾法,蒽铜比色法,斐林氏容量法。斐林氏容量法由于反应复杂,影响因素较多,所以不如铁氰化钾法准确,但其操作简单迅速,试剂稳定,故被广泛采用。蒽铜比色法要求比色时糖液浓度在一定范围内,但要求检测液澄清,此外,在大多数情况下,测定要求不包括淀粉和糊精,这就要在测定前将淀粉,糊精去掉,这样就使操作复杂化,限制了其广泛应用。 (一) 铁氰化钾法 1.原理:样品中原有的和水解后产生的转化糖都具有还原性质,在碱性溶液中能将铁氰化钾还原,根据铁氰化钾的 浓度和检验滴定量可计算出含糖量。其反应为下: C6H12O6+6K3[Fe(CN)6] + 6KOH →(CHOH)4·(COOH)2 + 6K4[Fe(CN)6]+ 4H2O 滴定终了时,稍过量的转化糖即将指示剂次甲基兰还原为无色的隐色体。 2,试剂 1)1%的次甲基兰指示剂 2)盐酸(水解作用) 3)10%和30%的 NaOH 溶液 4)1%铁氰化钾(贮存特色瓶,临用前标定) 标定步骤 称蔗糖1.0000g→定容500m l→取此液50m l→于100m l 容量瓶→加 hcl5m l→摇匀→65-70℃水裕15分钟→取出冷却→用30%NaOH 中和→加水于刻度→倒入滴定管中→取10m l1%铁氰化钾于锥形瓶中→加10%NaOH2.5m l加12.5m l 的水加玻璃珠颗粒→加热至沸→保持一分钟→加次甲基兰1滴→立即以糖液滴足至蓝色退去为止,记录用量。 正式滴定比较滴定时少0.5m l 糖液,煮沸1分钟,加指示剂一滴,再用糖液滴定至兰色褪去,计算铁氰化钾溶液的浓度。 A=(W·V)/(1000×0.95) A:相当于10m l 铁氰化钾溶液的...