精品文档---下载后可任意编辑SSTR 胞外区多克隆抗体的制备及其对猪垂体细胞GH 分泌的影响及机制的开题报告一、讨论背景生长激素(GH)是由垂体前叶分泌的蛋白质激素,对生长发育、代谢、免疫、生殖等方面具有重要作用。与肝脏中的生长激素受体(GHR)结合后,GH 能够促进本体细胞增殖、分化以及蛋白质合成。GH 的合成、分泌和以及与 GHR 的结合等多个环节都有其调控机制,其中 GH 释放激素(GHRH)和胆固醇代谢产物龙胆酸(LC)等都能够促进 GH 的分泌。生长激素抑制因子(SSTRs)是一类 G 蛋白偶联受体,与 SSTR 的激动剂联结后,能够抑制胞内环腺苷酸酶(AC)的活性,然后抑制细胞外信号的传导。然而在猪垂体细胞中,不同亚型的 SSTRs 对GH 的分泌影响并不相同,具体影响机制亟需深化讨论。二、讨论目的本论文旨在使用多克隆抗体来讨论 SSTR 胞外区在猪垂体细胞中的表达情况,并通过体外实验探究 SSTR 胞外区对 GH 分泌的影响及其机制。三、讨论方法1.制备和鉴定 SSTR 胞外区多克隆抗体通过基因工程技术制备 SSTRs 的胞外区融合蛋白,然后免疫小鼠,制备多克隆抗体。利用 SDS-PAGE 和 Western blot 技术鉴定抗体的灵敏度和特异性。2.猪垂体细胞细胞系的构建和分离将猪垂体组织细胞分离后,通过细胞培育的方法建立猪垂体细胞细胞系。通过细胞免疫荧光法鉴定细胞种类。3.实验组设计将猪垂体细胞细胞系分为对比组、SSTRs 激动剂处理组和 SSTRs 拮抗剂处理组。通过检测 GH 分泌和 GHRH、LC 等相关基因和蛋白的表达,探究 SSTRs 对 GH 分泌的影响机制。四、讨论意义本讨论通过制备多克隆抗体,成功对 SSTRs 的胞外区进行了表达,为深化探究 SSTRs 对 GH 分泌的影响机制提供了重要工具。本讨论对于精品文档---下载后可任意编辑了解 SSTRs 的作用机制以及讨论 GH 的分泌与调节具有重要的理论和实践意义。