实 验 二 酶活力测定方法的研究 — — 生 物 122 吕 越 1203070208 一 . 研 究 背 景 及 目 的 酶 是 具 有 生 物 催 化 功 能 的 高 分 子 物 质 。 在 生 物 体 内 , 酶 发 挥 着 非 常 广 泛 的 功 能 , 而 酶的 活 性 则 是 影 响 各 种 酶 功 能 的 一 个 重 要 的 指 标 。 对 于 此 次 研 究 对 象 小 麦 来 说 , 种 子 萌 发 过程 中 淀 粉 酶 的 活 性 更 是 与 糖 化 力 、 麦 种 的 优 劣 有 着 极 其 密 切 的 关 系[1]。 本 次 试 验 旨 在 完 成禾 谷 类 种 子 -小 麦 萌 发 过 程 中 淀 粉 酶 活 力 的 测 定 并 分 析 测 定 结 果 的 合 理 可 信 与 否 。 二 . 原 理 淀 粉 酶 是 水 解 淀 粉 的 糖 苷 键 的 一 类 酶 的 总 称 。 禾 谷 类 种 子 的 萌 发 时 可 快 速 将 支 链 淀 粉转 变 成 葡 萄 糖 , 由 此 我 们 推 断 禾 谷 类 种 子 中 存 在 不 止 一 种 淀 粉 酶 。 通 过 阅 读 资料[2], 整理出如下表格: 催 化 机理 合 成 时 期 钝化 条件 α-淀 粉 酶 内 切 酶 , 可 以水 解 淀 粉 内 部任何部位的 α-1,4-糖 苷 键 种 子 萌 发 过程 pH3.6 以下 β-淀 粉 酶 外切 酶 , 从淀 粉 的 非 还原 末端依次 水解 一 个 个 麦 芽二 糖 , 但不 能 越 过 已经存 在 的 α-1,6-糖 苷 键 继续 切 割 种 子 形 成 时 高 温 在 萌 发 的 种 子 中 , 这 两 种 淀 粉 酶 同 时 存 在 。 想 要 测 定 其 中 一 种 酶 的 活 性 , 就 要 设 法 钝化 另 一 种 酶 。 该 实 验 的 总 体 思 路 为 精 确 控 制 酶 促 反 应 的 条件, 保 持 其 处 于 最 适 条件, 测 定 酶 促 反 应的 初 速 度 来 表示 酶 的 活 力 。 通 过 3,5- 二 硝 基 水 杨 酸 比 色 法 确 定 催 化 产 麦 芽糖 的 含 量 。 三 . 仪 器 与 试 剂 1.仪 器 :低 速 离 心 机( 飞 鸽 牌 , TDL-40B, 上 海 安 亭 科 学 仪 器 厂 ) 722 分 光 光 度 计 ( ...