实验一凝集试验颗粒性抗原(细菌、螺旋体、红细胞等)与相应抗体结合后,在有适量电解质存在下,抗原颗粒可相互凝集成肉眼可见的凝集块,称为凝集反应(Agglutinationreaction)或凝集试验。参与凝集反应的抗原称为凝集原(Agglutinogen),抗体称为凝集素(Agglutinin)。细菌或其它凝集原都带有相同的负电荷,在悬液中相互排斥而呈现均匀的分散状态。抗原与相应抗体相遇后可以发生特异性结合,形成抗原抗体复合物,降低了抗原分子间的静电排斥力,此时已有凝集的趋向,在电解质(如生理盐水。参与下,由于离子的作用,中和了抗原抗体复合物外面的大部分电荷,使之失去了彼此间的静电排斥力,分子间相互吸引,凝集成大的絮片或颗粒,出现了肉眼可见的凝集反应。根据是否出现凝集反应及其程度,对待测抗原或待测抗体进行定性、定量测定。凝集反应包括直接凝集反应和间接凝集反应两大类,本实验主要介绍直接凝集反应。[目的要求]1. 掌握平板凝集试验和试管凝集试验的操作方法。2. 掌握凝集试验的结果判定及判定标准。3. 熟悉平板凝集试验和试管凝集试验所需材料和试剂。[材料与试剂]1. 玻板,载玻片,试管(1cmx8cm),试管架,刻度吸管,滴管,微量可调加样器,滴头(tip 头),牙签或火柴棒,记号笔。2. 灭菌的生理盐水,灭菌的 0.5%石炭酸生理盐水。3. 布氏杆菌病试管凝集抗原,布氏杆菌病平板凝集抗原,布氏杆菌病虎红平板凝集抗原,布氏杆菌病阳性血清,布氏杆菌病阴性血清,被检血清(牛、羊或猪。。4. 鸡白痢平板凝集抗原,鸡白痢阳性血清,鸡白痢阴性血清,被检鸡血清。[实验内容及操作方法](一。试管凝集试验以牛布氏杆菌病试管凝集试验为例。1. 试管准备:每份血清用试管 4 支,另取 3 支试管作为对照,作好标记,置试管架上。如被检血清有多份,对照只需做 1 份。2. 被检血清稀释:第 1 管加入 2.3ml0.5%石炭酸生理盐水,第 2、3、4 管加入 0.5ml0.5%石炭酸生理盐水;然后用加样器或刻度吸管吸取被检血清 0.2ml,加入第 1 管中,反复吹吸 5 次混匀,吸取 1.5ml 弃之,再吸取 0.5ml 加入第 2 管中,混匀后吸取 0.5ml 加入第 3 管,依此类推至第 4 管,混匀后吸弃 0.5ml(见表 1-1)。该被检血清的稀释度分别是 1:12.5、1:25、1:50、1:100。3. 对照管制作:第 5 管中加 0.5%石炭酸生理盐水 0.5ml,第 6 管加 1:25 稀释的布氏杆菌病阳性血清 0.5ml,第 7 管加 1:25 稀释的布氏杆菌病阴性血...