PCR 荧光检测试剂盒生产质量控制规程一. 微量加样器的使用规定1. 微量加样器校正：：使用微量加样器吸 10^110 次是否为100|!丨。2．加样前吸头润湿：当吸头排空时，仍会有一些残留的液体以薄膜的形式吸附在吸头里面，所以，在加样时先吸打液体数次，充分润湿吸头管腔,以保证加样的一致性。3. 加样时吸头应靠试管壁：加样时吸头的液体顺着管壁流出，防止液滴的形成由于其表面张力的作用而阻止样本的释放。4. 吸头是否与加样器上吸头套筒密封：样器上吸头与套筒密封完好。5. 加样时注意第一停点和第二停点：吸液是应注意大拇指按下按钮至第一停点，缓慢慢慢吸入液体。停留 1s,然后将吸头提离液面。用吸纸抹去吸嘴外面可能黏附的液滴。放液时经过第一停点，停 1-2s 后，继续按压到第二停点，排出残余液体。6. PCR 反应原液由于有甘油在冷的状态较黏稠，易于 1 次吸取数人份，慢一些。7. 边加边看，直观估计，防止跳管。8.低温冷藏批量 DNA 提取液、PCR 反应液 A 和 B 取出时是否充分混匀后，分装使用，PCR 反应液 A 和 B 是否避光低温冷藏和使用。9.配 PCR 反应液应先加缓冲液再加 PCR 反应液充分混匀，必要时倒置混匀，再离心，或用灭菌吸头上下吸几次。10.PCR 反应液（包括样品）应充分混匀：保证 PCR 反应曲线呈 S形，全阴性样品呈近似水平曲线。二. PCR 试验操作规程程序操作检查操作1混匀方法每一次提醒注意倒置混匀、移液器吹打、震荡，50000rpm 离心 1 分钟。2取血清样本1）因水分蒸发变浓2）冻状、混浊按（1）法混匀，再取 25 卩 l 加水 5 卩 l 混匀。温水浴 37°C 溶解按（1）法混匀，或 12000rpm 离心 5 分钟，取清液。3取质控品冻状、混浊温水浴 37°C 溶解按（1）法混匀或 12000rpm 离心 5 分钟，取清液。4血清样本稀释混匀血清阴性血清 40 卩 l 加阳性血清10 卩丨，按（1）法混匀。5 倍稀释5质控品稀释混匀质控品血清稀释液 40 卩丨加质控品 10卩丨，按（1）法混匀 5 倍稀释。6血清样本 DNA提取DNA 提取液完好血清样本按（1）法混匀，取30 卩 l 加 DNA 提取液 60 卩丨，按（1）法混匀，98C8 分钟变性，0C 冷却 2-3 分钟，12000rpm,离心 10 分钟，吸7质控品 DNA变性分装，有效，呈清液状态，未反复加热、冻融质控品按（1）法混匀，取30 卩 l5000rpm 离心 1 分钟，98C5 分钟变性,5000rpm，离心 1 分钟，吸取上清液。8PCR 反应液混匀状...
