请描述生物工程下游技术的一般工艺流程,并分析各步可采用方法及其原理按生产过程分,下游技术工艺过程大致可分为 4 个阶段,即预处理、提取(初步分离)、精制(纯化)、成品制作
发酵液 T 预处理 T 细胞分离 T 细胞破壁 T 碎片分离 T 提取 T 精制-成品制作加热过滤匀浆法离心沉淀(重)结晶浓缩调 PH离心研磨法双水相吸附离子交换干燥絮凝膜分离酶解法膜分离萃取色谱分离无菌加工超滤膜分离成型结晶(1)预处理和固液分离加热法:加热可降低液体黏度,只适用于产物对热较稳定的发酵液
在适当的温度和受热时间下可使菌体或蛋白质凝聚形成较大颗粒的凝聚物,改善发酵液固液分离特性
加热是蛋白质变性凝固的有效方法
调节 PH 法:PH 直接影响发酵液中某些物质的电离度和电荷性质,调节 PH 可以改变菌体和蛋白质的带电性质,从而改变其过滤特性
蛋白质属于两性电解质,两性电解质在溶液中的 PH 处于等电点时分子表面净电荷为零,导致赖以稳定的双电层及水化膜的削弱或破坏,分子间引力增加溶解度最小
因此,调节溶液的 PH,可使蛋白质溶解度下降而析出,这是除去蛋白质的有效方法
改变 PH,还能使蛋白质变性凝固
絮凝:在某些高分子絮凝剂的存在下
基于桥架的作用,使胶粒形成絮凝团的过程
(2)提取(初步分离)沉淀:在溶液中加入沉淀剂使溶质溶解度降低,生成无定形固体从溶液中析出的过程
原理:沉淀分离就是通过沉淀,在固-液分相后,除去留在液相或沉积在固相中的非必要成分
吸附:吸附是利用吸附剂对液体或气体中某一组分具有选择性吸附的能力,使其富集在吸附剂表面的过程
吸附的原理:固体内部分子所受分子间的作用力是对称的,而固体表面分子所受力是不对称的向内的一面受内部分子的作用力较大,而表面向外一面所受的作用力较小,因而当气体分子或溶液中溶质分子在运动过程中碰到固体表面时就会被吸引而停留在固体表面上
萃取:利用溶质在