精品文档---下载后可任意编辑消毒与灭菌效果的评价方法与标准 第一篇 压力蒸汽灭菌效果评价方法与标准 1 主题内容与适用范围 本方法规定了压力蒸汽灭菌技术标准及其评价灭菌效果的检测方法。 本方法适用于对压力蒸汽灭菌设备灭菌效果的评价。 2 试剂 本标准所用试剂，凡未说明规格者，均为分析纯（AR），水为蒸馏水。 2．1 蛋白胨。 2．2 葡萄糖。 2．3 溴甲酚紫酒精溶液：取溴甲酚紫 2．0g，溶于 100mL95％乙醇中。 2．4 溴甲酚紫蛋白胨水培育基配制：蛋白胨 10．0g，葡萄糖 5．0g，溶于 1000mL 蒸馏水中，调 pH 值至 7．0～7．2，然后再加 2％溴甲酚紫酒精溶液 0．6mL，摇匀后，按5mL/管，分装包口，置压力蒸汽灭菌器中，于 115℃灭菌 40min 后备用。 3 指示菌 嗜热脂肪杆菌芽胞（ATCC 7953 或 SSI K31）菌片，含菌量为 5×105～5×106cfu/片，121℃下，杀灭 90％微生物所需时间 D121 值为 1．3～1．9min，杀灭时间（KT 值）为≤19min，存活时间（ST 值）为≥3．9min。 4 化学指示剂 需用卫生部批准的化学指示剂。 5 技术要求压力蒸汽灭菌器 压力， MPa/cm2 温度℃ 灭菌时间, min 下排气式 1154012130预真空式 1344-6国家技术监督局 1995-12-15 批准 1996-07-01 实施 6 检测方法 6．1 生物学指标（用作压力蒸汽灭菌设备灭菌效果的依据）。1 精品文档---下载后可任意编辑 6．1．1 将嗜热脂肪杆菌芽胞菌片两个分别放入灭菌小纸袋内，置于标准试验包中心部位。 6．1．2 灭菌柜室内，上、中层中央和排气口处各放置一个标准试验包（由 3 件平纹长袖手术衣，4 块小手术巾，2 块中手术巾，1 块大手术巾，30 块 10cm×10cm、8 层纱布敷料包裹成 25cm×30cm×30cm 大小）。手提压力蒸汽灭菌器用通气贮物盒（22cm×13cm×6cm）代替标准试验包，盒内盛满中试管，指示菌片放于中心部位两只灭菌试管内（试管口用灭菌牛皮纸包封），将盒平放于手提压力蒸汽灭菌器底部。 6．1．3 经一个灭菌周期后，在无菌条件下，取出标准试验包或通气贮物盒中的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培育基中，56℃培育 48h，观察培育基颜色变化。 6．2 化学指标 在物品包外用化学指示胶带，可作为物品是否经过灭菌的处理标志。在物品包内中心部位用化学指示剂，可作为物品是否灭菌的参考标志。 7 结果判定及评价 7．1 同次检测中，标准试验包或通气贮物盒内，每个指示菌片接种的...
