精品文档---下载后可任意编辑消毒与灭菌效果的评价方法与标准 第一篇 压力蒸汽灭菌效果评价方法与标准 1 主题内容与适用范围 本方法规定了压力蒸汽灭菌技术标准及其评价灭菌效果的检测方法。 本方法适用于对压力蒸汽灭菌设备灭菌效果的评价。 2 试剂 本标准所用试剂,凡未说明规格者,均为分析纯(AR),水为蒸馏水。 2.1 蛋白胨。 2.2 葡萄糖。 2.3 溴甲酚紫酒精溶液:取溴甲酚紫 2.0g,溶于 100mL95%乙醇中。 2.4 溴甲酚紫蛋白胨水培育基配制:蛋白胨 10.0g,葡萄糖 5.0g,溶于 1000mL 蒸馏水中,调 pH 值至 7.0~7.2,然后再加 2%溴甲酚紫酒精溶液 0.6mL,摇匀后,按5mL/管,分装包口,置压力蒸汽灭菌器中,于 115℃灭菌 40min 后备用。 3 指示菌 嗜热脂肪杆菌芽胞(ATCC 7953 或 SSI K31)菌片,含菌量为 5×105~5×106cfu/片,121℃下,杀灭 90%微生物所需时间 D121 值为 1.3~1.9min,杀灭时间(KT 值)为≤19min,存活时间(ST 值)为≥3.9min。 4 化学指示剂 需用卫生部批准的化学指示剂。 5 技术要求压力蒸汽灭菌器 压力, MPa/cm2 温度℃ 灭菌时间, min 下排气式 1154012130预真空式 1344-6国家技术监督局 1995-12-15 批准 1996-07-01 实施 6 检测方法 6.1 生物学指标(用作压力蒸汽灭菌设备灭菌效果的依据)。1 精品文档---下载后可任意编辑 6.1.1 将嗜热脂肪杆菌芽胞菌片两个分别放入灭菌小纸袋内,置于标准试验包中心部位。 6.1.2 灭菌柜室内,上、中层中央和排气口处各放置一个标准试验包(由 3 件平纹长袖手术衣,4 块小手术巾,2 块中手术巾,1 块大手术巾,30 块 10cm×10cm、8 层纱布敷料包裹成 25cm×30cm×30cm 大小)。手提压力蒸汽灭菌器用通气贮物盒(22cm×13cm×6cm)代替标准试验包,盒内盛满中试管,指示菌片放于中心部位两只灭菌试管内(试管口用灭菌牛皮纸包封),将盒平放于手提压力蒸汽灭菌器底部。 6.1.3 经一个灭菌周期后,在无菌条件下,取出标准试验包或通气贮物盒中的指示菌片,投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培育基中,56℃培育 48h,观察培育基颜色变化。 6.2 化学指标 在物品包外用化学指示胶带,可作为物品是否经过灭菌的处理标志。在物品包内中心部位用化学指示剂,可作为物品是否灭菌的参考标志。 7 结果判定及评价 7.1 同次检测中,标准试验包或通气贮物盒内,每个指示菌片接种的...