细胞不均匀的问题 原因： 1.培养液量少，由于瓶体内液体有向边缘吸的特性，所以造成中间低洼，细胞容易聚集，建议多加液体 2.接种后不要摇晃，传统的思想认为摇一摇能使细胞均匀，但是事实上在摇晃的时候由于剪应力等多种因素的影响，细胞反而分布不均。 解决方案： 1) 接种到培养瓶的细胞，轻轻地让细胞悬液流遍整个瓶底； 2) 接种到培养皿或者培养板的细胞，用枪头对准中央加，让细胞悬液自行流遍整个孔，若有少量区域未能覆盖到细胞悬液，可用枪头轻轻牵引悬液，千万不要摇。细胞悬液铺满后，不宜立刻放入孵箱中，我一般静置>15min，这样接种的细胞很均匀。 3) 培养皿 划“十”字交叉轻轻混匀（力度不易太大，否则剪切力损伤细胞），重复一次。 轻轻放入孵箱即可。 （1）平底和圆底（U 型和 V 型）培养板的区别和选择： 贴壁细胞一般用平底培养板。悬浮型细胞的培养一般用 V 型。 U 型培养板亦多用于培养悬浮型细胞 。V 型培养板有时用做免疫学血凝集的实验。 （2）细胞培养常见问题与解答 问：我看到培养板有 4、6、12、24、48、96 孔几种规格 ，但不知道到底什么实验用哪种规格。 答：要根据你具体的实验要求，流式一般用 6 孔，MTT 一般用 96 孔，细胞爬片一般用 24 孔等，要具体根据你实验来定。 问：我想测吸光度用酶标仪，用多孔细胞培养板行吗？请问酶标板 多孔细胞培养板有什么区别？ 答：用多孔细胞培养板测吸光度肯定可以拉，我们经常用它来做样品的蛋白定量和 MTT 检测。 区别：酶标板一般要比细胞培养板贵，细胞板主要做细胞培养，但也可以用来测蛋白浓度；酶标板包括包被板和反应板，一般不能用做细胞培养，它主要做免疫酶联反应后的蛋白检测，它需要更高的要求还需要特定的酶标工作液。常用不同培养板的孔底面积及推荐加液量：不同孔板所加培养液的液面都不宜太深，一般在 2-3m m 范围，结合不同孔的底面积就可算出各培养孔的适宜加液量。若加液量过多会影响气体（氧气）交换，而且在搬动过程中易溢出造成污染。具体所加细胞密度依实验的目的不同灵活掌握。 （3）细胞培养板的密闭和污染问题 问：96，24 孔培养板或培养皿的盖子都很松，这样是方便了透气，但是细菌、霉菌等污染物会不会也随着溜进去呢？ 答：1.盖子很松，属于半开放培养，这样的目的是透气（实际上是为了使培养皿外的 co2 能够与培养皿充分交换，维持培养基的 pH 值）。 2.凡事有利必有弊，这样当然增加了...
