常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱
我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱
由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助
一:柱子可以分为:加压,常压,减压 压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数
所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的
减压柱能够减少硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发(有时在柱子外面有水汽凝结),以及有些比较易分解的东西可能得不到,而且还必须同时使用水泵抽气(很大的噪音,而且时间长)
以前曾经大量的过减压柱,对它有比较深厚的感情,但是自从尝试了加压后,就几乎再也没动过减压的念头了
加压柱是一种比较好的方法,与常压柱类似,只不过外加压力使淋洗剂走的快些
压力的提供可以是压缩空气,双连球或者小气泵(给鱼缸供气的就行)
特别是在容易分解的样品的分离中适用
压力不可过大,不然溶剂走的太快就会减低分离效果
个人觉得加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的
二:关于柱子的尺寸 应该是粗长的最好
柱子长了,相应的塔板数就高
柱子粗了,上样后样品的原点就小(反映在柱子上就是样品层比较薄),这样相对的减小了分离的难度
试想如果柱子十厘米,而样品就有二厘米,那么分离的难度可想而知,恐怕要用很低极性的溶剂慢慢冲了
而如果样品层只有 0
5 厘米,那么各组分就比较容易得到完全分离了
当然采用粗大的柱子要牺牲比较多的硅胶和溶剂了,不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了(有些不环保的说,不过溶剂回收重蒸后也就减小了部分浪费)
现在见到的柱子径高比一般在 1:5~10,书中写硅胶量是样品量的 30~40倍,具体的选择要具体分析
如果所需组分和杂质分的比较开(是指在所需组分rf 在 0