一 、 电 镜 练 习 题 及 答 案 一 、 透 射 电 镜 标 本 取 材 的 基 本 要 求 并 简 要 说 明 。 答 : 取 材 的 基 本 要 求 如 下 : 组 织 从 生 物 活 体 取 下 以 后 , 如 果 不 立 即 进 行 及 时 固 定 处 理 , 就 有 可 能 出 现 缺血 缺 氧 后 的 细 胞 超 微 结 构 的 改 变 , 如 细 胞 出 现 细 胞 器 变 性 或 溶 解 等 现 象 , 这 些 都可 造 成 电 镜 观 察 中 的 人 为 假 象 , 直 接 影 响 观 察 结 果 分 析 , 甚 至 导 致 实 验 失 败 。 此外 , 由 于 处 理 不 当 造 成 组 织 微 生 物 污 染 , 导 致 细 胞 的 超 微 结 构 结 构 遭 受 破 坏 。 因 此 , 为 了 使 细 胞 结 构 尽 可 能 保 持 生 前 状 态 , 取 材 成 败 是 关 键 , 取 材 成 功 的关 键 在 于 操 作 者 必 须 要 注意把握“快、 小、 冷、 准”四个取 材 要 点。 (1).快: 就 是 指取 材 动作 要 迅速, 组 织 从 活 体 取 下 后 应在 最短时 间 (争取 在 1~2 分 钟之内)投入前 固 定 液。 对于 实 验 动物 , 最好在 断血 流、 断气之前 就 进 行 取材 , 以 免缺 血 缺 氧 后 使 细 胞 代谢发生 改 变 而破 坏 细 胞 的 超 微 结 构 。 当 然, 最好是采用灌注固 定 法。 为 了 使 前 固 定 的 效果 更佳, 组 织 块要 充分 和固 定 液混合, 应采用振荡固 定 10分 钟以 上, 有 条件的 可 采用微 波固 定 法固 定 。 (2).小: 由 于 常用的 固 定 剂渗透 能 力较弱, 组 织 块如 果 太大, 块的 内部将不 能得到良好的 固 定 。 因 此 所取 组 织 的 体 积要 小, 一 般不 超 过1mm3。 为 便于 定 向包埋,可 将组 织 修成 大小约1mm×1mm×2mm 长条形。 (3).冷: 为 了 防止酶对自身细 胞 的 酶解 作 用, 取 材 操 作 最好在 低温(5℃~15℃)环境下 进 行 , 这 样可 以 降低酶的 活 性 , 防止细 胞 自溶 。 所采用的 固 定 剂以 及 取 材器 械要 预先在 冰箱(5℃)中 存放一 段时 间。 (4).准...