胡萝卜组织培养

1 . 研究背景 1 .1 胡萝卜 胡萝卜(Daucus carota L．)为伞形科植物，是世界上最重要的蔬菜作物之一，占蔬菜生产总量的3％，达13．5百万吨(Hole，1996)。胡萝卜块根营养丰富，约含有88％的水、6％～8％糖、1％～2％植物纤维，0．7％～1．2％蛋白质、1％灰份及 0～3％脂肪[1] 。由于其富含维生素 A前体类胡萝b素和植物纤维，因而是一种重要的营养保健品。其适于生食、加工、烹调等多种用途。中国是农业大国，胡萝卜作为蔬菜作物在人们生活中起着重要的作用。 因此继续深入研究胡萝卜细胞培养还是很有必要的。 1 .2 组织培养 植物组织培养是在含有营养物质及植物生长物质的培养基中，培养离体植物组织（器官或细胞）并诱导使其长成完整植株的技术[2]。其理论基础是植物细胞具有全能性，即一个完整的植物细胞拥有形成一个完整植株所必需的全部遗传信息，具有发育成完整植株的潜能，在适宜的条件下能够发育成一个完整的植株。进行离体培养时，植物的组织或器官通过脱分化形成愈伤组织。 胡萝卜价格比较便宜，材料易得，而且在组织培养方面容易诱导发生，我们可以通过这个实验熟悉植物组培。 2 2. 材料与方法 2 .1 材料 培养皿、锥形瓶、无菌纸、镊子、解剖刀、烧杯、量筒、玻璃棒、酒精灯、无菌操作台、高压灭菌锅、微波炉、PH试纸。 MS培养基、2,4-D、6-BA、活性炭、无菌水、蔗糖、琼脂粉、75%酒精、1% (体积比)浓度的次氯酸钙溶液、胡萝卜块根（2012-2-21-怡购，2012-2-24-水果摊，2012-3-13-水果摊，2012-3-21-珠影，2012-3-29-荣一） 2 .2 方法 2.2.1 MS 培养基的配制 200m l  用大烧杯取无菌水 100-120ml  依次用移液管量取加入母液：20ml大量（10x）、2ml微量（100x）、2ml铁盐（100x）、4ml有机（50x）、2mg/L2,4-D。  称取 6g蔗糖加入，搅拌直至全部溶解。  用量筒定容至 20ml。  用 pH试纸调 pH至 6.0-6.2  称取 1.6g琼脂加入，搅拌。  放入微波炉内加热直至清澈无沉淀。  分装后高压灭菌 3h。 探究实验 1激素为 1.0mg/L2,4-D，1.0mg/L6-BA[3] 探究实验 2激素为 2.2mg/L2,4-D[3 4] 3 2 .2 .2 培养条件  接种环境 1先用 75%酒精擦拭无菌操作台的内部 6个面。 2将现配的 75%的酒精、1%次氯酸钠、刀、镊子、无菌纸、无菌水、小烧杯、培养皿、废液缸、试管架、打火机等操作用的工具放置到相应位置。 3将酒精灯添加适当的酒精（不超过容积的 2/3...