材料仅供参考选修 3《现代生物科技专题》知识点总结专题 1 基因工程 基因工程的概念基因工程是指按照人们的心愿，进行严格的设计，通过体外 DNA 重组和转基因技术 ,给予生物以新的遗传特性,制造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在 DNA 分子水平 上进行设计和施工的,又叫做DNA 重组技术。〔一〕基因工程的根本工具1•“分子手术刀”一一限制性核酸内切酶〔限制酶〕〔1〕来源：主要是从原核生物中别离纯化出来的。〔2〕功能：能够识别双链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。〔3〕结果：经限制酶切割产生的 DNA 片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2.“分子缝合针〃——DNA 连接酶 （1）两种 DNA 连接酶〔E・coliDNA 连接酶和 TDNA 连接酶〕的比拟：4-① 相同点：都缝合磷酸二酯键。② 区别：E・coliDNA 连接酶来源于大肠杆菌,只能将双链 DNA 片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而 T4DNA 连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。⑵ 与 DNA 聚合酶作用的异同:DNA 聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个 DNA 片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA 连接酶DNA 聚合酶不同点连接的 DNA双链单链模板不要模板要模板连接的对象2 个 DNA 片段单个脱氧核苷酸加到已存在的单链 DNA 片段上相同点作用实质形成磷酸二酯键化学本质蛋白质3.-----------------“分子运输车〃载体〔1〕载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。② 具有一至多个限制酶切点，供外源 DNA 片段插入。 ③ 具有标记基因，供重组 DNA 的鉴定和选择。 〔2〕最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力的双链环状 DNA 分子。〔3〕其它载体：入噬菌体的衍生物、动植物病毒（二）基因工程的根本操作程序第一步：目的基因的猎取1. 目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2. 原核基因采取直接别离获得,真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3. PCR 技术扩增目的基因〔1〕PCR 的含义：是一项在生物体外复制特定 DNA 片段的核酸合成技术。〔2〕目的：猎取大量的目的基因〔3〕原理：DNA 双链复制 〔4〕过程：第一步：加热至 90〜95°CDNA 解链为单链 :第二...
