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沙门氏菌的检验食品学院 14 食品质量与安全 1 班刘文敏柳基炜卫杰恒温紫君201430520115201430520116201430520121201430520122摘要：本实验采用 GB/T4789.4—2010 的检测方法测定鸡场中的沙门氏菌。通过本实验学习沙门氏菌的检测方法和技术，了解沙门氏菌的一些生化特性；本实验先用显色培养基找出可疑菌落，再做生化试验找出可疑的典型性的沙门氏菌，再通过血清学试验最终确定是否为沙门氏菌属。关键词:沙门氏菌接种生化试验血清学鉴定沙门氏菌病是公共卫生学中具有重要意义的人畜共患病种之一，其病原沙门氏菌属于肠道细菌科。沙门氏菌是一个统称，泛指 2000 多种有紧密连系的细菌，包括引起食物中毒,导致胃肠炎、伤寒和副伤寒的细菌。虽然只有少数人因沙门氏菌而患病，但是,在世界范围内的细菌性食物中毒事件中，由沙门氏菌引起的占大多数。因此，采用科学、合理的方法检验食品中沙门氏菌，已经成为了人们最关心的问题之一⑴。国标法（GB4789.4-2010）是目前中国规定的食品中沙门氏菌的标准检测方法,也是基层实验室普遍采用的检测方法,它根据沙门氏菌的生长特点和生化特性，采取前增菌、增菌、分离、生化试验和血清学鉴定 5 个步骤进行［2］。1 材料与方法1.1 实验材料1.1。1 仪器设备均质器、三角烧瓶、平皿、玻璃棒、接种棒恒温培养箱：36°C±1°C,42°C±1°C吸管：1mL（具 0。01mL 刻度）、10mL（具 0°lmL 刻度或微量移液器及吸头电子天平 PL602—S,梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司；手提式不锈钢压力蒸汽灭菌锅 SYQ-DSX—280B,上海申安医疗器械厂1。1.2 试剂药品鸡肠、靛基质试剂、沙门氏菌 O 和 H 诊断血清、API20E 生化试剂盒或 VITEKGNI生化鉴定卡1.1.3 培养基蛋白胨水(BPW)、四硫磺酸钠煌绿(TTB)、亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液、亚硫酸铋(BS)琼脂、HE 琼脂、三糖铁琼脂、蛋白胨水、尿素琼脂、氰化钾、氰化钾对照、赖氨酸脱羧酶、赖氨酸脱羧酶对照、甘露醇、山梨醇、B-D 半乳糖苷(ONPG)培养基1。2 实验方法1.2.1 培养基的制备1。2。1。1 培养基的配制步骤蛋白胨水(BPW):称取蛋白胨 10g、氯化钠 5g、磷酸氢二钠 9g、磷酸二氢钠 1。5g、蒸馏水 1000ml，将各成分加入蒸馏水中，搅混均匀,静置约 10min,煮沸溶解，调节 pH,高压灭菌 121°C,15min。分装 10 瓶，每瓶 90ml四硫磺酸钠煌绿(TTB)：高压灭菌 121C,15min 灭菌冷却后至 30C,每 100ml 基础培养液加碘液 2ml,煌绿液 1ml1.2.1。2 配...