选修选修 33 专题专题 11 基因工程复习提纲基因工程复习提纲高二一部生物 李真真 2024/4/22基因工程的概念1。基因工程是指根据人们的愿望，进行严格的设计，通过体外 DNA 重组和转基因技术 ，给予生物以新的遗传特性,制造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在 DNA 分子 水平上进行设计和施工的，又叫做 DNA 重组技术 。2、其操作水平在 DNA 分子水上进行设计和施工.3、操作环境是在生物体外。1。1 基因工程的基本工具1 。“分子手术刀”—— 限制性核酸内切酶（限制酶）来源多数来自原核生物作用切割双链 DNA 分子特点识别特定的核苷酸序列,并切开特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键,因此具有专一性.结果形成黏性末端或平末端2。“分子缝合针"——DNA 连接酶 （1）两种 DNA 连接酶（E·coliDNA 连接酶和 T4-DNA 连接酶)的比较：① 相同点：都缝合磷酸二酯键。② 区别：E·coliDNA 连接酶来源于大肠杆菌,只能将双链 DNA 片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而 T4DNA 连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。（2）与 DNA 聚合酶作用的异同：DNA 聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键.DNA 连接酶是连接两个 DNA 片段 的末端，形成磷酸二酯键。3.“分子运输车”-—载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存 。 ② 具有一至多个限制酶切点，供外源 DNA 片段插入 . ③ 具有标记基因 , 供重组 DNA 的鉴定和选择 。 （2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核 DNA 之外 ，并具有自我复制能力的双链环状 DNA 分子.其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒1.2 基因工程的基本操作程序第一步： 目的基因的猎取 1.目的基因是指: 编码蛋白质的结构基因 。2. 猎取方法：从基因文库中猎取、利用 PCR 技术扩增、人工合成（反转录法 _ 和化学合成法 _) .1）基因文库、基因组文库及部分基因文库① 基因文库：将含有某种生物不同基因的许多 DNA 片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库。② 基因文库种类：基因组文库（含有一种生物的全部基因)、部分基因文库(含有一种生物的部分基因如 cDNA 文库）。2)PCR 技术扩增目的基因（1）原理：DNA 双链复制原理 （2）过程:第一步：加热至 90～95℃DNA 解链 ; 第二...
