选修 3《现代生物科技专题》知识点总结 专题 1 基因工程基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外 DNA 重组和转基因技术 ，赋予生物以新的遗传特性，发明出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在 DNA 分子水平 上进行设计和施工的，又叫做 DNA 重组技术 。一、基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（ 限制酶 ） （1）来源：重要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：可以识别双链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）成果：经限制酶切割产生的 DNA 片段末端一般有两种形式：黏性末端和平末端。2.“分子缝合针”——DNA 连接酶 (1)两种 DNA 连接酶（E·coliDNA 连接酶和 T4-DNA 连接酶）的比较：① 相似点：都缝合磷酸二酯键。② 区别：E·coliDNA 连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链 DNA 片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而 T4DNA 连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。(2)与 DNA 聚合酶作用的异同:DNA 聚合酶只能将单个核苷酸加到已经有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA 连接酶是连接两个 DNA 片段 的末端，形成磷酸二酯键。DNA 连接酶DNA 聚合酶不一样点连接的 DNA双链单链模板不要模板要模板连接的对象2 个 DNA 片段单个脱氧核苷酸加到已存在的单链 DNA 片段上相似点作用实质形成磷酸二酯键化学本质蛋白质3.“分子运送车”——运载体（1）运载体具有的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保留。② 具有一至多种限制酶切点，供外源 DNA 片段插入。 ③ 具有标识基因，供重组 DNA 的鉴定和选择。 （2）最常用的运载体是质粒,它是一种裸露的、构造简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状 DNA 分子 。（3）其他运载体：λ 噬菌体的衍生物、动植物病毒 二、基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1.目的基因是指： 编码蛋白质的构造基因 。2.原核基因采用直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用措施有反转录法 _ 和化学合成法 _ 。3.PCR 技术扩增目的基因（1）PCR 的含义：是一项在生物体外复制特定 DNA 片段的核酸合成技术。（2）目的：获取大量的目的基因（3）原理：DNA 双链复制 （4）过程：第一步：加热至 90～95℃，DNA 解链为单链 ；第...
