医学专科开设琼脂糖凝胶电泳实验的教学体会

医学专科开设琼脂糖凝胶电泳实验的教学体会摘要：琼脂糖凝胶电泳是生物化学中常用的分离技术之一，在医学基础讨论及分析中有广泛的应用。本文结合医学专科院校琼脂糖凝胶电泳实验的开设，对从实验前的各项准备工作到学生实验的教学过程及实验课后的思考等方面进行分析和总结，以期为今后的实验教学改革提供参考。关键词：生物化学实验；琼脂糖凝胶电泳；教学体会琼脂糖凝胶电泳是核酸分析常用的实验技术，是核酸讨论工作中不可缺少的重要手段，广泛应用于基础理论讨论、科学、医学卫生、工业生产等许多领域，在生物化学和分子生物学的教学和科研中具有重要作用。[1-2]我校自 2024 年为医学专科学生增开该实验以来，受到广阔学生的欢迎，收到良好的教学效果。本实验在实际的操作过程中由于实验试剂、耗材准备比较复杂，微小的疏忽都会导致实验的失败，在长期的实验准备和教学过程中，我们总结了一些教学经验和教学体会。一、实验前准备实验设备及材料的准备。待测 DNA，琼脂糖，电泳仪，电泳槽，紫外透射反射仪，酒精灯，100ml 烧杯，微量移液器，三羟甲基氨基甲烷，盐酸，醋酸钠，EDTA，琼脂糖，溴酚蓝，溴化乙锭。二、实验课中1.琼脂糖胶的制备。本实验配制的是质量浓度为 1%的 50mL 凝胶。在电炉上将胶熔至清亮透明的溶液状，冷却到 60℃左右，加染料GV（GoldView），每 100ml 胶加 5pl，摇匀，倒入事先装好的水平电泳槽内，梳子根据样品量选用。凝胶厚度一般为 0.3～0.5cm。待凝胶完全凝固后（于室温放置 30～45min），在梳子齿附近加入少量电泳缓冲液，然后缓慢轻轻地向上拔掉梳子，将凝胶放入电泳槽中。2.点样。点样量要根据点样孔大小和样品浓度确定，一般上样体积约5～10uL。点样前，样品需根据配比添加上样缓冲液，吹打均匀后，移液器吸取样品，垂直于点样孔，用另一只手帮助固定移液器下端，移液器枪头尖端进入点样孔即可将样品注入孔内，注意不可将枪头尖端插至孔底，并选择其他点样孔点上适合的 DNA 分子量标准（DNAMarker）。所谓适合是指样品 DNA 分子量大小应基本在 DNA 分子量标准范围之内。3.电泳。将电泳仪的正极与电泳槽的正极相连，负极与负极相连。核酸带负电荷，从负极向正极移动，胶的点样孔一端应放在电泳槽的负极接线一端。电泳槽中电泳缓冲液与制胶用电泳缓冲液应相同，电泳缓冲液（1 某 TBE），使其恰好没过胶面约 lmm。电泳缓冲液太多则电流加大，凝胶发热，设置好电源，一般采纳恒压电源，电压...