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胸腹水脱落细胞学检查涂片方法的改进

胸腹水脱落细胞学检查涂片方法的改进_第1页
胸腹水脱落细胞学检查涂片方法的改进_第2页
胸腹水脱落细胞学检查涂片方法的改进一般方法用吸管吸取血性胸腹水底部的沉淀物入离心管,离心后直接涂片,染色,观察结果。结果评价,玻片上血细胞满视野,间皮细胞很少。改进方法低渗氯化钾液+甲醇:冰醋酸液破坏法,取 4.8g 氯化钾溶于 1000ml蒸馏水中,制成低渗氯化钾液(0.66mol/L)。①吸取血性胸腹水 16ml 入离心管内,1500r/分,离心 7 分钟,弃上清液;②加入氯化钾溶液 16ml,用吸管将沉淀物吹打混匀,室温下静置 20 分钟;③甲醇:冰醋酸(3∶1)混合液滴加 10 滴,混匀后 1500r/分,离心 7 分钟,弃上清液;④离心管加入甲醇:冰醋酸混合液 16ml,将沉淀物吹打混匀后,室温下静置 15 分钟,弃上清液(2 次);⑤将沉淀物均匀涂抹于玻片上,固定染色,观察结果。结果评价,玻片上很少见到红细胞、间质细胞、肿瘤细胞、淋巴细胞较完整,细胞轮廓清楚,胞膜完整,胞质及胞核染色清楚。讨论血性胸腹水涂片制作的关键是如何既破坏红细胞,又保持其他细胞的完整性。一般的制作方法由于沉淀物中主要为红细胞,从而影响对肿瘤细胞的观察。低渗氯化钾液+甲醇∶冰醋酸混合液的方法,效果较好。该方法除能完全破坏红细胞外,还能较好的保持其他细胞的完整性,有利于提高阳性检出率。低渗氯化钾液+甲醇:冰醋酸法每一步均有不同的原理。第1 步加入低渗氯化钾液后静置,液体逐渐进入细胞内,离心时滴加甲醇:冰醋酸液、甲醇能起到固定的作用,而冰醋酸能迅速凝固蛋白(假如血性胸腹水非常黏稠,不需加甲醇∶冰醋酸液,可直接离心再加入氯化钾低渗液,静置 20 分钟,离心时再加入甲醇:冰醋酸液,否则会全部成黏稠状)。第 2 步加入甲醇:冰醋酸液,主要起到固定作用。经上述处理后的血性胸腹水涂片,肿瘤细胞、间质细胞、淋巴细胞较完整,红细胞几乎完全消逝。

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