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齐鲁医学BCA蛋白定量

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凯基 BCA 蛋白含量检测试剂盒Cat Number:KGPBCAFor Research Use OnlyStore at -20℃ for one yearExpire date: 一、 试剂盒说明 BCA 蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根据目前世界上最常用蛋白浓度检测方法之一 BCA 法研制而成,实现了蛋白浓度测定的简单,高稳定性,高灵敏度和高兼容性。检测浓度下限达到 25 微克/毫升,最小检测蛋白量达到 0.5 微克,待测样品体积为 1~20 微升。二、 试剂盒组份组 份Cat: KGPBCA 试 (100 assay 酶标板/20assay1mL 比色杯)Cat: KGPBCA (250 assay 酶标板/50assay1mL 比色杯)蛋白标准溶液(0.5 μg/μL )2 mL5 mLBCA 试剂 A20 mL25 mL×2BCA 试剂 B0.4mL1mL三、 操作步骤A. 酶标板操作1. 标准曲线的绘制:取一块酶标板,根据下表加入试剂孔号01234567蛋白标准溶液(μL)01248121620去离子水(μL)2019181612840对应蛋白含量(μg)00.51.02.04.06.08.010.02. 根据样品数量,按 50 体积 BCA 试剂 A 加 1 体积 BCA 试剂 B(50:1)配制适量 BCA 工作液,充分混匀;3. 各孔加入 200μL BCA 工作液;4. 把酶标板放在振荡器上振荡 30sec,37℃放置 30 分钟,然后在 562nm 下比色测定。以蛋白含量(μg)为横坐标,吸光值为纵坐标,绘出标准曲线;5. 稀释待测样品至合适浓度,使样品稀释液总体积为 20μL,加入 BCA 工作液 200μL,充分混匀,37℃放置 30 分钟后,以标准曲线 0 号管做参比,在 562nm 波长下比色,记录吸光值;,6. 根据所测样品的吸光值,在标准曲线上即可查得相应的蛋白含量(μg),除以样品稀释液总体积(20μL),乘以样品稀释倍数即为样品实际浓度(单位:μg/μL)。 B. 分光光度计测定1. 标准曲线的绘制:各管根据下表加入试剂孔号01234567蛋白标准溶液(μL)051020406080100去离子水(μL)1009590806040200对应蛋白含量(μg)02.55.010.020.030.040.050.02. 根据样品数量,按 50 体积 BCA 试剂 A 加 1 体积 BCA 试剂 B(50:1)配制适量 BCA 工作液,充分混匀;3. 各管加入 1000μL BCA 工作液;4. 各管充分混匀,37℃放置 30 分钟,然后在 562nm 下比色测定。以蛋白含量(μg)为横坐标,吸光值为纵坐标,绘出标准曲线;5. 稀释待测样品至合适浓度,样品稀释液总体积为 100μL,加入 BCA 工作液 1000μL,充分混匀,37℃放置 30 分钟后...

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