齐鲁医学BCA蛋白定量

凯基 BCA 蛋白含量检测试剂盒Cat Number：KGPBCAFor Research Use OnlyStore at -20℃ for one yearExpire date： 一、 试剂盒说明 BCA 蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根据目前世界上最常用蛋白浓度检测方法之一 BCA 法研制而成，实现了蛋白浓度测定的简单，高稳定性，高灵敏度和高兼容性。检测浓度下限达到 25 微克/毫升，最小检测蛋白量达到 0.5 微克，待测样品体积为 1～20 微升。二、 试剂盒组份组 份Cat: KGPBCA 试 （100 assay 酶标板/20assay1mL 比色杯）Cat: KGPBCA （250 assay 酶标板/50assay1mL 比色杯）蛋白标准溶液（0.5 μg/μL ）2 mL5 mLBCA 试剂 A20 mL25 mL×2BCA 试剂 B0.4mL1mL三、 操作步骤A． 酶标板操作1. 标准曲线的绘制：取一块酶标板，根据下表加入试剂孔号01234567蛋白标准溶液（μL）01248121620去离子水（μL）2019181612840对应蛋白含量（μg）00.51.02.04.06.08.010.02. 根据样品数量，按 50 体积 BCA 试剂 A 加 1 体积 BCA 试剂 B（50:1）配制适量 BCA 工作液，充分混匀；3. 各孔加入 200μL BCA 工作液；4. 把酶标板放在振荡器上振荡 30sec，37℃放置 30 分钟，然后在 562nm 下比色测定。以蛋白含量（μg）为横坐标，吸光值为纵坐标，绘出标准曲线；5. 稀释待测样品至合适浓度，使样品稀释液总体积为 20μL，加入 BCA 工作液 200μL，充分混匀，37℃放置 30 分钟后，以标准曲线 0 号管做参比，在 562nm 波长下比色，记录吸光值；,6. 根据所测样品的吸光值，在标准曲线上即可查得相应的蛋白含量（μg），除以样品稀释液总体积（20μL），乘以样品稀释倍数即为样品实际浓度（单位：μg/μL）。 B． 分光光度计测定1. 标准曲线的绘制：各管根据下表加入试剂孔号01234567蛋白标准溶液（μL）051020406080100去离子水（μL）1009590806040200对应蛋白含量（μg）02.55.010.020.030.040.050.02. 根据样品数量，按 50 体积 BCA 试剂 A 加 1 体积 BCA 试剂 B（50:1）配制适量 BCA 工作液，充分混匀；3. 各管加入 1000μL BCA 工作液；4. 各管充分混匀，37℃放置 30 分钟，然后在 562nm 下比色测定。以蛋白含量（μg）为横坐标，吸光值为纵坐标，绘出标准曲线；5. 稀释待测样品至合适浓度，样品稀释液总体积为 100μL，加入 BCA 工作液 1000μL，充分混匀，37℃放置 30 分钟后...