学习细菌培养的基本技术1．实验目的（1）了解配制培养基的一般步骤和方法。（2）练习配制牛肉膏蛋白胨培养基。（3）了解灭菌的基本原理，以及实验室中常用的灭菌方法。（4）初步学会细菌培养的基本技术。2．实验原理根据细菌的需要配制培养基，在培养之前要彻底灭菌。根据某种细菌的营养需要而选择多种原料配制而成的培养基，不仅含有这种细菌生长繁殖所需要的各种营养物质，还要有适宜的pH、离子浓度。本实验所用的牛肉膏蛋白胨培养基，应用较广泛，适于芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌等多种细菌的培养，配制好的培养基必须经过灭菌。灭菌是指杀死液体或固体表面所有微生物的细胞、芽孢和孢子。对不同的材料，应当采取不同的灭菌方法。培养基一般采用高压蒸气灭菌法，就是将待灭菌的培养基放入密闭的高压蒸气灭菌锅内，通过加热使锅内的水沸腾并产生水蒸气。当水蒸气将锅内的冷空气排尽以后，关闭排气阀并继续加热，这时锅内的压力就会升高，最终使菌体蛋白质凝固变性，从而达到灭菌的目的。接种环是用火焰烧灼灭菌的。无菌室或超净工作台则是通过紫外线照射灭菌的。将某种细菌接种在彻底灭菌的培养基上，经过一段时间的培养后，就能够得到生长良好的细菌群体，它们在培养基上会呈现出一定的形态特征。3．实验材料天平、角匙、200 mL 烧杯、试管、漏斗、量筒、玻棒、滴管、胶管、弹簧夹、铁架台、酒精灯、石棉网、三角架、火柴、纱布、棉花、牛皮纸、线绳、标签、接种环、pH 试纸、金属小筐、高压蒸汽灭菌锅、无菌操作箱。芽孢杆菌或金黄色葡萄球菌、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、NaCl、浓度为 1 mol/L 的 NaOH 溶液、体积分数为 75%的酒精溶液、蒸镏水。4．实验方法与步骤（1）培养基的配制细菌培养的基础是配制培养基牛肉膏蛋白胨培养基的配方然后再加热溶解，补足水分，其制作过程包括以下几个环节：① 清洁玻璃器皿 一般用肥皂液煮沸 30 min,或用重铬酸钾和浓硫酸配制的溶液浸泡数 10 min，然后用清水冲洗，晾干后保存备用。② 配制液体培养基 a．根据需要配制培养基数量，先在烧杯中注入少量蒸馏水；b．按培养基配方称量各种成分的原料，依次使之溶解；c．补足需水量；d．如用牛肉膏、蛋白胨配制时，需加热熔化后溶解；e．加热后，补足水分即可。③ 配制固体培养基 在液体培养基里加入一定量的琼脂，加热熔化即可。④ 调 pH 先用精密 pH 试纸测量培养基的原始 pH，如果偏酸，用滴管向培养基滴加 1 mol/L 的 NaOH 溶液，边...
