2012高中生物实验13DNA片段的PCR扩增辅导教案 浙科版

辅导教案导学诱思 DAOXUEYOUSI一、PCR 技术1．PCR 的全称是：____________。2．PCR 技术是用于 DNA 片段复制、扩增的生化技术。3．PCR 技术用途：除用于基因扩增外，还用于____________。4．PCR 技术的具体应用：在法学、医学、食品和考古学上也是重要的实用工具，如______鉴定、______鉴定、食品质量的确定、______病诊断、肿瘤病和其他疾病的诊断以及考古中人种的确定等。答案：1.聚合酶链反应3．测定 DNA 序列4．亲子 犯罪 遗传二、DNA 的体内自我复制与 PCR 技术DNA 聚合酶在有________的存在时，利用 4 种____________，可从____末端向____末端合成新链。PCR 技术还需要____________________作为________________，这一段叫______。答案：DNA 模板 脱氧核苷三磷酸 5′ 3′ 与 DNA 模板互补的一段单链 DNA 聚合酶作用的起点 引物三、PCR 作用的过程1．1 个循环的操作：步骤具体操作双链 DNA____将双链 DNA 加热至____℃，DNA____，DNA 之间的______打开，双链分离(也叫做______)续表步骤具体操作与______结合双链分离后，将温度____________℃，这一降温过程叫______。退火后，引物可与 2 个____________分别结合DNA 新链的______ ______℃下，聚合酶可利用________组装模板的互补链，从引物延伸至____末端2.一般大约需要重复上述 3 步骤______个循环。3．结果：一个循环形成____个双链 DNA，在 20 个循环后(大约 1h),1 个 DNA 片段可扩增上百万个拷贝，30 个循环可产生 10 亿个拷贝。答案：1.分开 95 变性 氢键 解链 引物 迅速降至 40～60 退火 单链的 DNA 模板 延伸 72 4 种 dNTP 3′2．15～303．2四、实验操作1．设备、用品(略)2．材料：凝胶、DNA 标样、PCR 试剂盒、TBE 缓冲液、0.1%亚甲蓝3.步骤： 文字说明：取 3 个 0.5 mL 微量离心管，分别记做 1、2、3 号。用取样器按表一加入试剂，关闭上盖并在振荡器上振荡 20 s，使之混合均匀↓将 3 个微量离心管放在固定器上，保证每管中的液面在水浴中的水面以下。依表二的时间依次放入 3 个水浴进行 PCR↓将 TBE 缓冲液加入到电泳槽中，使缓冲液高出凝胶面 3~4 mm，再将样品加入凝胶板的加样孔中。所加顺序内容依次为：凝胶板中的加样情况说明表加样孔编号（对应右图所示）1234离心管中样品标号SA1A2A3所加样品1 号样品20 微升DNA 标准溶液PCR 产物 1（72 ℃1min 后得到的）PCR 产...