第 36 讲 基因工程[考纲要求] 1.基因工程的诞生(Ⅰ)。2.基因工程的原理及技术(Ⅱ)。3.基因工程的应用(Ⅱ)。4.蛋白质工程(Ⅰ)。考点一 基因工程的概念和基本工具[重要程度：★★★☆☆]一、基因工程的概念1．供体：提供目的基因。2．操作环境：体外。3．操作水平：分子水平。4．原理：基因重组。5．受体：表达目的基因。6．本质：性状在受体体内的表达。7．优点：克服远缘杂交不亲和的障碍，定向改造生物的遗传性状。二、DNA 重组技术的基本工具1．限制性核酸内切酶(简称：限制酶)(1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。(2)作用：识别特定的核苷酸序列并切开相应两个核苷酸之间的磷酸二酯键。(3)结果：产生黏性末端或平末端。2．DNA 连接酶(1)种类：按来源可分为 E·coli DNA 连接酶和 T4DNA 连接酶 。(2)作用：将双链 DNA 片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。3．载体(1)种类：质粒、λ 噬菌体的衍生物、动植物病毒等。(2)质粒的特点1．下图为限制酶和 DNA 连接酶的关系，据图回答：(1)限制酶和 DNA 连接酶的作用部位相同吗？相同。(2)DNA 连接酶起作用时是否需要模板？不需要。2．探究载体所具条件的意义条 件意 义稳定并能自我复制目的基因稳定存在且数量可扩大有一个至多个限制酶切割位点可携带多个或多种外源基因具有特殊的标记基因便于重组 DNA 的鉴定和选择 易错警示 巧辨基因工程操作基本工具的 8 个易错点(1)限制酶是一类酶，而不是一种酶。(2)限制酶的成分为蛋白质，其作用的发挥需要适宜的理化条件，高温、强酸或强碱均易使之变性失活。(3)在切割目的基因和载体时要求用同一种限制酶，目的是产生相同的黏性末端。(4)将一个基因从 DNA 分子上切割下来，需要切两处，同时产生 4 个黏性末端。(5)不同 DNA 分子用同一种限制酶切割产生的黏性末端都相同，同一个 DNA 分子用不同的限制酶切割，产生的黏性末端一般不相同。(6)限制酶切割位点应位于标记基因之外，不能破坏标记基因，以便进行检测。(7)基因工程中的载体与细胞膜上物质运输的载体不同。基因工程中的载体是 DNA 分子，能将目的基因导入受体细胞内；膜载体是蛋白质，与细胞膜的通透性有关。(8)基因工程中有 3 种工具，但工具酶只有 2 种。1．已知一双链 DNA 分子，用限制酶Ⅰ切割得到长度为 120 kb(kb：千碱基对)片段；用限制酶Ⅱ切割得到 40 kb 和 80 kb 两个片段；同时用限制酶Ⅰ和限制...
